操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:F-12營養(yǎng)培養(yǎng)基
規(guī)格:500ml
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體英文名稱:Jak3 0.1ml RAS癌基因家族成員RAB1A(RAB1A)ELISA試劑盒 RAB1A ELISA Kit
白血病相關蛋白5抗體英文名稱:LEU5 0.2ml Enkurin蛋白(ENKUR)ELISA試劑盒 ENKUR ELISA Kit
膽囊收縮素8抗體英文名稱:CCK8 0.1ml 苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)ELISA試劑盒 NP ELISA Kit
原鈣粘附蛋白β1抗體英文名稱:PCDHB1 0.1ml
垂體瘤細胞凋亡抗體英文名稱:RHBDD3 0.2ml
抑素抗體英文名稱:Tumstatin 0.2ml
絲氨酸/精氨酸相關核基質(zhì)蛋白3抗體英文名稱:SRRM3 0.2ml
凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 0.5mg
蛋白激酶B(抗原)Akt/PKB 0.5mg
艾滋病病毒-1/人類 缺陷病毒1型(抗原)HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 0.5mg
兔子腫瘤壞死因子αTNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit 96T
大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1TSP-1 ELISA Kit 96T
高遷移率族蛋白A1抗體英文名稱:HMGA1 0.2ml 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶6(GALNT6)ELISA試劑盒 GALNT6 ELISA Kit
人α肌動蛋白Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit 96T
自噬相關蛋白16A抗體英文名稱:ATG16L 0.2ml 酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒 aFGF-1 ELISA Kit
Bcl2相互作用蛋白2抗體英文名稱:BNIP2 0.1ml 球蛋白重鏈(IgH)ELISA試劑盒 IgH ELISA Kit
F-12營養(yǎng)培養(yǎng)基β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次索非那新琥珀酸鹽 Solifenacin succinate 242478-38-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
羧酸酯酶(carboxylesterase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次結晶紫 Crystal violet 548-62-9 質(zhì)量規(guī)格:BS
細胞谷氨酰半胱氨酸合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次結晶紫(進口) Crystal violet 548-62-9 質(zhì)量規(guī)格:用于生化研究,進口
組織谷氨酰半胱氨酸合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次碘硝基四唑紫(INT) Iodonitrotetrazolium chloride(INT) 146-68-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
植物谷氨酰半胱氨酸合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次乙基紫 Ethyl Violet 2390-59-2 質(zhì)量規(guī)格:80%,進分
細胞谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次酸性紫49 Acid Violet 49 1694-09-3 質(zhì)量規(guī)格:IND,進分
組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次皂黃 Metanil yellow 587-98-4 質(zhì)量規(guī)格:AR
植物谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次橙黃G;酸性橙10 Orange G 1936-15-8 質(zhì)量規(guī)格:BS
谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次橙黃Ⅱ OrangeⅡ 633-96-5 質(zhì)量規(guī)格:AR
谷氨酰胺合酶(glutamine synthetase)活性酶連續(xù)反應比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次柯衣定 Chrysoidin 532-82-1 質(zhì)量規(guī)格:AR
谷氨酰胺脫羧酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:日落黃 Sunset Yellow FCF 2783-94-0 質(zhì)量規(guī)格:BS
鳥氨酸脫羧酶(Ornithine decarboxylase) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:酒石黃;檸檬黃;酸性黃 23 Tartrazine 1934-21-0 質(zhì)量規(guī)格:BS
細胞甘油-3-磷酸脫氫酶(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase)總活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次酸性黃17 Acid Yellow 17 6359-98-4 質(zhì)量規(guī)格:AR
組織甘油-3-磷酸脫氫酶(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase)總活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次5-TAMRA;5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺脂 5-TAMRA, SE 150810-68-7 質(zhì)量規(guī)格:>90%