相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:熒光定量PCR試劑盒
貨號:BJ-205572
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 μL、20
μL、200 μL、1000 μL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的**離心管、吸頭(10 μL、200 μL、1000 μL)、**雙蒸水。
苯扎貝特(標(biāo)準(zhǔn)品) Bezafibrate 41859-67-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
布南色林 Blonanserin 132810-10-7 質(zhì)量規(guī)格:>99%
溴夫定 Brivudine 69304-47-8 質(zhì)量規(guī)格:純度≥99.0%,含量≥98.5%
溴夫定(標(biāo)準(zhǔn)品) Brivudine 69304-47-8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
卡巴他賽 Cabazitaxel 183133-96-2 質(zhì)量規(guī)格:≥99%
米托蒽醌 Mitoxantrone 65271-80-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR
拉莫三嗪 Lamotrigine 84057-84-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
拉莫三嗪 (標(biāo)準(zhǔn)品) Lamotrigine 84057-84-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
D-半乳糖醛酸 D-Galacturonic acid 91510-62-2 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,97%,一水
D-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Galacturonic acid 91510-62-2 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定;一水物
骨化三醇 Calcitriol 32222-06-3 質(zhì)量規(guī)格:純度≥98%,BR
坎地沙坦酯 Candesartan cilexetil 145040-37-5 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于 培養(yǎng)
坎地沙坦酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Candesartan cilexetil 145040-37-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
卡奈替尼 Canertinib 267243-28-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
GEMSA 2-Guanidinoethylmercaptosuccinic Acid 77482-44-1 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)口原裝Santa,99%
枸櫞酸噴托維林/托可拉斯/妥克拉司 Carbetapentane citrate/Pentoxyverine citrate 23142-01-0 質(zhì)量規(guī)格:含量98.0%~100.5%
卡洛芬 Carprofen 53716-49-7 質(zhì)量規(guī)格:>99%
卡洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Carprofen 53716-49-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
長春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Catharanthine 2468-21-5 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
阿苯達(dá)唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Albendazole 54965-21-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
阿苯達(dá)唑 Albendazole 54965-21-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
西立伐他汀鈉 Cerivastatin sodium 143201-11-0 質(zhì)量規(guī)格:BR
西替利嗪 Cetirizine 2HCl 83881-52-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)口分裝植物超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 50次
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/**裂解樣品制備試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 50次
酵母/**超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 50次
超氧化物歧化酶(SOD)**裂解樣品制備試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 50次
**超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 50次
動物 /組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
動物 /組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
植物組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒(附標(biāo)準(zhǔn)樣) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
超氧化物歧化酶(SOD)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100次
熒光定量PCR試劑盒活體組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:8/20次
活體組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:40/100次
冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
**/酵母 內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
**/酵母 內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
植物 內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
植物 內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的**和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。