商品介紹：

測(cè)定意義

α-KGDH（EC 1.2.4.2）廣泛存在于動(dòng)物、植物微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是三羧酸循環(huán)調(diào)控關(guān)鍵酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脫羧**琥珀酰輔酶A。

測(cè)定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶A**琥珀酰輔酶A、 二氧化碳和 NADH，NADH在340 nm有特征吸收峰，以NADH的**速率表示α-KGDH活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

儀器：

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺(tái)式離心機(jī)

4、漩渦混勻器

生化法檢測(cè)試劑盒：分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法，自主**，技術(shù)**團(tuán)隊(duì)，操作簡(jiǎn)便快捷，規(guī)格合理、系列成套，價(jià)格合理，是廣大科研工作者的好選擇。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

Exatecan Mesylate  Exatecan甲磺酸鹽  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

血鎂濃度測(cè)試盒(微量法)  100管/96樣

ELN-441958  B1受體拮抗劑(ELN-441958)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

AO/EB雙熒光染色試劑盒  100T

活化凝血時(shí)間(ACT)檢測(cè)試劑盒(凝固法)  50T

Uric acid Assay Kit  尿酸測(cè)試盒(比色法)  50管/48樣

Rnase A；Ribonuclease A  核糖核酸酶A(100mg/ml)  2ml|0.5ml

Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method  總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒(ABTS法)  >300次

NVP-BVU972  Met抑制劑（NVP-BVU972）  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

Protein A Agarose  蛋白A瓊脂糖  2ml

Oncrasin-1  K-Ras抑制劑(Oncrasin-1)  1mL(10mM)|10mg|50mg

Ezatiostat  GSTP1-1抑制劑（Ezatiostat）  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

Daun02  拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(Daun02)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg

莢膜染色液(Hiss法)  2×20ml|2×50ml

α酮戊二酸脫氫酶（αKGDH）生化試劑盒（微量法）小鼠凝血酶受體(TR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管癌細(xì)胞英文名稱：CaEs-17

大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管癌細(xì)胞英文名稱：Eca-109

大鼠孕**/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管癌細(xì)胞英文名稱：KYSE450

人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管癌細(xì)胞英文名稱：Eca-109

人抗心肌抗體(AMA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管癌細(xì)胞英文名稱：KYSE410

人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

小鼠肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  視網(wǎng)膜muller細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  輸尿管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL