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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:100管/96樣
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化試劑盒測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
詳情介紹:

生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。

產(chǎn)品名稱

測定方法

規(guī)格

貨號

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化試劑盒

微量法

100管/96樣

BJ-01611373-100管/96樣

商品介紹:

測定意義:

PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動物、植物、微生物和細(xì)胞中,催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶。

測定原理:

PEPCK催化草酰乙酸**磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化**NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。

需自備的儀器和用品:

分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。


儀器:

1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)

3、臺式離心機(jī)

4、漩渦混勻器

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化試劑盒PDGFRα/β和FLT3抑制劑Crenolanib1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

IGF-1R抑制劑(Linsitinib)Linsitinib1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

干擾素調(diào)節(jié)因子3抑制劑(IRF3抑制劑)(Geldanamycin)Geldanamycin1mL(10mM)|5mg|10mg

IDO抑制劑(NLG919)Indoleamine-(2,3)-dioxygenase inhibitor1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

EZH2EZH1抑制劑(UNC1999)UNC19991mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

LAT1抑制劑(JPH203)JPH2031mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)LY30234141mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

H3K27me3demethylase抑制劑(GSK-J4)GSK-J41mL(10mM)|10mg|50mg

DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑(Campathecin)Campathecin1mL(10mM)|100mg|500mg

拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑Irinotecan hydrochloride1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg

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