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PCR出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶問題對(duì)策
日期：2024-11-23 00:21
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摘要：
PCR出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶問題對(duì)策：
1、引物用量偏大，引物的特異性不高。應(yīng)調(diào)換引物或降低引物的使用量。
2、循環(huán)的次數(shù)過多。適當(dāng)增加模板的量，減少循環(huán)次數(shù)。
3、酶的用量偏高或酶的質(zhì)量不好，應(yīng)降低酶量或調(diào)換另一來源的酶。
4、退火溫度偏低，退火及延伸時(shí)間偏長(zhǎng)。應(yīng)提高退火溫度，減少變性與延伸時(shí)間，也可采用二種溫度的PCR擴(kuò)增。
5、樣品處理不當(dāng)。
6、Mg2+濃度偏高，因適當(dāng)調(diào)整Mg2+使用濃度。
7、若為PCR試劑盒，也可能時(shí)試劑盒本身質(zhì)量有問題...
PCR出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶問題對(duì)策：
1、引物用量偏大，引物的特異性不高。應(yīng)調(diào)換引物或降低引物的使用量。
2、循環(huán)的次數(shù)過多。適當(dāng)增加模板的量，減少循環(huán)次數(shù)。
3、酶的用量偏高或酶的質(zhì)量不好，應(yīng)降低酶量或調(diào)換另一來源的酶。
4、退火溫度偏低，退火及延伸時(shí)間偏長(zhǎng)。應(yīng)提高退火溫度，減少變性與延伸時(shí)間，也可采用二種溫度的PCR擴(kuò)增。
5、樣品處理不當(dāng)。
6、Mg2+濃度偏高，因適當(dāng)調(diào)整Mg2+使用濃度。
7、若為PCR試劑盒，也可能時(shí)試劑盒本身質(zhì)量有問題。