菌種的傳代與保存

1、菌斜面（保存）

培養(yǎng)基應新鮮制備，如斜面已無冷凝水者，不宜再使用。標簽上注明菌名及接種日期。

至冰箱取出的菌種斜面，應在室溫放置約30分鐘，待溫度平衡后再移入接種室或超凈工作臺。

點燃酒精燈，用左手握住菌種斜面，將管口靠進火焰旁，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅30秒，隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過3次。左手將管口在火焰上旋轉燒灼，右手用無名指、小指及掌部夾住棉塞，撥開棉塞，將接種環(huán)伸人管內先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷卻再移至菌苔上，刮去少量菌苔，隨即取出接種棒，并將菌種管口移至火焰旁。

堵上棉塞，左手將菌種管放下，取營養(yǎng)瓊脂斜面1支，照上述操作打開棉塞，將接種環(huán)伸入管內至瓊脂斜面的低部，由底向上，將接種環(huán)輕貼斜面的表面曲折移動，使xi 菌劃在斜面的表面上。

取出接種棒，在火焰旁將培養(yǎng)基管棉塞堵上，然后將接種過xi 菌的接種棒在火焰上燒灼滅jun。

將已接種畢的xi 菌管置35~37℃培養(yǎng)22~24小時，霉菌管一般置20~25℃霉菌培養(yǎng)箱內培養(yǎng)7日。取出后放人冰箱保存，一般 3個月轉種一次。

2、菌斜面-營養(yǎng)肉湯-分離平板-菌斜面

如果菌落形態(tài)不典型可純化，按下列方法傳代（分離菌落）：用接種環(huán)取上述菌管（斜面）菌苔少許接種置營養(yǎng)肉湯中(5mL/支，已滅jun)，置35~37℃培養(yǎng)18~24小時后，再用接種環(huán)取培養(yǎng)好的營養(yǎng)肉湯菌懸液（濃菌液），接種于分離平板，置35~37℃培養(yǎng)18~24小時，用接種針選典型菌落劃線于營養(yǎng)瓊脂斜面，置35~37℃培養(yǎng)18~24小時。一般同時接種幾支管，其中一支用于以后菌種傳代或接種到半固體瓊脂培養(yǎng)基中，其它用做工作菌種。

常用分離平板包括：大腸埃希菌——EMB瓊脂平板；銅綠假單胞菌——溴化十六烷*銨瓊脂培養(yǎng)基；金黃色葡萄球菌——甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基。