Western Blot常用來比較不同條件下或不同細胞組織中目標蛋白表達量的相對多少，因此必須先確定上樣量相同，才有比較的基礎(chǔ)。在Western Blot實驗中，可能因總蛋白濃度測定不準確，或是蛋白質(zhì)上樣時因操作產(chǎn)生誤差，所以必須設(shè)置內(nèi)部參照組來進行校正。此內(nèi)部參照必須在不同細胞或組織間表達相對恒定，且有高水平的表達量，來確保不同樣品間蛋白定量相同。而這樣的參照蛋白，就稱為內(nèi)參，對應(yīng)的抗體就稱為內(nèi)參抗體。內(nèi)參抗體有以下三個：

1、beta Actin，肌動蛋白，細胞骨架蛋白。它們在各組織和細胞中的表達相對恒定，在檢測蛋白的表達水平變化時常用它來做參照物。beta Actin 作為內(nèi)參是得到公認的，針對大多數(shù)組織和細胞來說的，它廣泛分布于細胞質(zhì)內(nèi)，表達量非常豐富。但是在一些少量特殊的情況下比如脂肪組織和細胞內(nèi)，beta Actin 的表達量就很少。

2、GAPDH，甘油醛-3-磷酸脫氫酶，該酶是糖酵解反應(yīng)中的一個酶，幾乎在所有組織細胞中都高水平表達，在同種細胞或組織中的表達量一般是恒定的，且很少受外部誘導(dǎo)物的影響。但比如缺氧和糖尿病等ji 病存在下，會增加 GAPDH 在特定細胞和組織中的表達。

3、beta Tubulin，微管蛋白，細胞骨架蛋白?！睛?Tubulin小鼠單克隆抗體(3G6)，#A01030】 作為內(nèi)參抗體，beta Tubulin 表達通常不會發(fā)生改變，因此被廣泛用于 Western Blot 內(nèi)參，也常被用于免yi 染色觀察細胞的微管結(jié)構(gòu)。