細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的時(shí)間把控如下:

        細(xì)胞在體外生長(zhǎng)期間，通常分為三個(gè)階段：潛伏期、指數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期。潛伏期通常是細(xì)胞剛剛傳代，此時(shí)細(xì)胞開(kāi)始貼附基質(zhì)和伸展骨架，代謝活動(dòng)集中在粘附蛋白和骨架蛋白的表達(dá)，細(xì)胞數(shù)量在這段時(shí)間內(nèi)幾乎沒(méi)有增加。

隨后，細(xì)胞開(kāi)始指數(shù)生長(zhǎng)期，轉(zhuǎn)錄翻譯過(guò)程旺盛，胞內(nèi)物質(zhì)、信號(hào)傳遞迅速，細(xì)胞數(shù)量迅速增長(zhǎng)。如果在這個(gè)時(shí)期凍存，實(shí)際上是強(qiáng)行將細(xì)胞凍結(jié)在代謝的某一時(shí)刻，勢(shì)必造成對(duì)解旋的DNA、轉(zhuǎn)錄翻譯中的RNA和蛋白的機(jī)械損傷，增加個(gè)別環(huán)節(jié)發(fā)生錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)。

隨著細(xì)胞數(shù)量的增長(zhǎng)，培養(yǎng)容器內(nèi)，細(xì)胞匯合達(dá)到90%以上。大部分細(xì)胞因?yàn)?/span>“接觸抑制”而停止高速代謝和增殖，胞內(nèi)活動(dòng)趨于平緩。所以，建議在剛剛進(jìn)入平臺(tái)期時(shí)凍存細(xì)胞，既可以獲得足量的細(xì)胞，也不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成過(guò)多的機(jī)械損傷。