【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:總抗氧化能力(T-AOC)測試盒(FRAP法)
規(guī)格:96T
測試方法:微板法
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體英文名稱:IAA 0.2ml Sideroflexin2蛋白(SFXN2)ELISA試劑盒 SFXN2 ELISA Kit
FAM71A蛋白抗體英文名稱:FAM71A 0.2ml 內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒 ITLN1 ELISA Kit
神經(jīng)細(xì)胞蛋白Nav1抗體英文名稱:Neuron navigator 1 0.2ml
腦胰蛋白酶3抗體英文名稱:PRSS3 0.2ml
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)抗體英文名稱:TGF beta 2 0.1ml
血管內(nèi)皮生長因子A英文名稱:VEGF-A 0.1ml
小鼠胰島細(xì)胞抗體ICA(Mouse islet cell antibody) ELISA KIT 96T
膠體金標(biāo)記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/Gold 0.5ml
結(jié)直腸癌缺失基因抗原DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 0.5mg
大鼠表皮生長因子受體(EGFR)ELISA Kit 96T
大鼠CD44分子CD44 ELISA Kit 96T
大鼠高遷移率族蛋白B1HMGB-1 ELISA Kit 96T
人過氧化物酶體增殖物激活受體αPPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 96T
人聚集蛋白Human Agrin ELISA Kit 96T
鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體英文名稱:ATP1A1 0.2ml 視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 RBP-4 ELISA Kit
異染色質(zhì)蛋白1(磷酸化多肽)phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 0.5mg
總抗氧化能力(T-AOC)測試盒(FRAP法)異龍腦;DL-Isoborneol 124-76-5 20mg 訂購|咨詢
鹽酸拓?fù)涮婵?/span>;Topotecan hyd 119413-54-6 20mg 訂購|咨詢
延齡草苷;Diosgenin gluco 14144-06-0 20mg 訂購|咨詢
異槲皮素;Isoquercitrin 21637-25-2 20mg 訂購|咨詢
鹽酸水蘇堿;Stachydrine hy 4136-37-2 20mg 訂購|咨詢
異阿魏酸;3-Hydroxy-4-met 537-73-5 20mg 訂購|咨詢
鳶尾苷元磺酸鈉;tectorigenin 548-77-6 20mg 訂購|咨詢
原人參三醇;Protopanaxatri 1453-93-6 20mg 訂購|咨詢
原人參二醇;Protopanaxdiol 30636-90-9 20mg 訂購|咨詢
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。