操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:胃蛋白酶測試盒
規(guī)格:50管/24樣
測試方法:比色法
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計的實(shí)驗(yàn)方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
人肝癌抗原PHC(Human primary hepatic carcinoma) ELISA Kit 96T
人腺病毒IgMADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 96T
水通道蛋白-2抗體英文名稱:Aquaporine 2 0.1ml 乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 HPA ELISA Kit
磷酸化蛋白激酶R抗體英文名稱:Phospho-PKR (Thr451) 0.1ml
9號染色體開放閱讀框57抗體英文名稱:C9orf57 0.2ml 人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)ELISA試劑盒 AMA-M2 ELISA Kit
絲切蛋白抗體英文名稱:cofilin 0.1ml 表面膜 球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒 mIgD ELISA Kit
磷酸化細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體英文名稱:phospho-CXCR4 (Ser339) 0.2ml 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白10(LCN10)ELISA試劑盒 LCN10 ELISA Kit
肌萎縮Dystrobrevin β蛋白抗體英文名稱:DTNB 0.2ml 突觸融合蛋白10(STX10)ELISA試劑盒 STX10 ELISA Kit
3號染色體開放閱讀框65抗體英文名稱:C3orf65 0.2ml 甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒 MASP ELISA Kit
胰島葡萄糖6磷酸酶2抗體英文名稱:Glucose 6 phosphatase 2 0.2ml 含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)ELISA試劑盒 RCBTB2 ELISA Kit
白介素26抗體英文名稱:IL-26/AK155 0.2ml 半椎蛋白2(HMCN2)ELISA試劑盒 HMCN2 ELISA Kit
小鼠抗丙酮酸激酶-M2抗體英文名稱:PKM2 0.1ml
磷酸化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體英文名稱:phospho-NRP1(Thr916) 0.1ml
羅丹明標(biāo)記的兔抗人IgMRabbit Anti-human IgM/RBITC 0.3ml
RNA結(jié)合蛋白20抗體英文名稱:RBM20 0.1ml
四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白)英文名稱:TSPAN2 0.2ml
胃蛋白酶測試盒光甘草定;Glabridin 59870-68-7 20mg 訂購|咨詢
高烏甲素;Lappaconitine(p 32854-75-4 20mg 訂購|咨詢
甘草酸;Glycyrrhizic aci 1405-86-3 20mg 訂購|咨詢
甘草酸單銨鹽;Glycyrrhizic 53956-04-0 20mg 訂購|咨詢
β-谷甾醇;β-Sitosterol 83-46-5 20mg 訂購|咨詢
橄欖苦苷;Oleuropein 32619-42-4 20mg 訂購|咨詢
佛手柑素;Bergamotine 7380-40-7 20mg 訂購|咨詢
西紅柿堿;Tomatine 17406-45-0 10mg 訂購|咨詢
非洲防己堿;Columbamine 3621-36-1 20mg 訂購|咨詢
佛司可林;Forskolin 66575-29-9 20mg 訂購|咨詢