【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明！

產(chǎn)品名稱：線粒體呼吸鏈復(fù)合物 Ⅳ 活性測(cè)試盒
規(guī)格：20管/10樣
測(cè)試方法：生化法
客戶自備儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 
常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾）。
4 ）. 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：
1、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
A激酶錨定蛋白5抗體英文名稱：AKAP5 0.2ml  轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒  TTR ELISA Kit

果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體英文名稱：alpha-L-arabinofuranosidase 1ml  乳鐵蛋白(LTF)ELISA試劑盒  LTF ELISA Kit

胰羧肽酶A1抗體英文名稱：CPA1 0.1ml  核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)ELISA試劑盒  NFκB ELISA Kit

C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體英文名稱：CLEC1/CLEC1A 0.2ml  組蛋白脫乙酰基酶11(HDAC11)ELISA試劑盒  HDAC11 ELISA Kit

泛素特異性蛋白酶9X抗體英文名稱：USP9X 0.2ml  

EYA4蛋白抗體英文名稱：EYA4 0.2ml  矢車菊苷δ2(CENTδ2)ELISA試劑盒  CENTδ2 ELISA Kit

谷氨酸受體3抗體英文名稱：Glutamate receptor 3 0.1ml  巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒  MCSF ELISA Kit

同源盒蛋白HOXD10抗體英文名稱：HOXD10 0.2ml  非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶6(PTPN6)ELISA試劑盒  PTPN6 ELISA Kit

肥大細(xì)胞類糜蛋白酶1抗體英文名稱：Mast Cell Chymase 0.1ml  Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒  CTXⅠ ELISA Kit

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱：phospho-MEK5(Ser129) 0.1ml  

天冬氨酸蛋白酶ASP4抗體英文名稱：ASP4 0.2ml  

前動(dòng)力蛋白2抗體英文名稱：PROK2 0.2ml  

核蛋白相互作用蛋白1抗體英文名稱：SRP1 0.2ml  

PEST含核蛋白抗體英文名稱：PCNP 0.2ml  

硫酸酯酶2蛋白抗體英文名稱：Sulfatase 2 0.2ml  

APC標(biāo)記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/APC 0.1ml  

線粒體呼吸鏈復(fù)合物 Ⅳ 活性測(cè)試盒茶堿 ;Theophylline 58-55-9 100mg 訂購(gòu)|咨詢

刺五加葉中;Hederasaponin 36284-77-2 20mg 訂購(gòu)|咨詢

長(zhǎng)梗冬青苷;Pedunculoside 42719-32-4 20mg 訂購(gòu)|咨詢

重樓皂苷Ⅶ;Polyphyllin VI 76296-75-8 20mg 訂購(gòu)|咨詢

重樓皂苷Ⅵ;Polyphyllin VI 55916-51-3 20mg 訂購(gòu)|咨詢

重樓皂苷II;Chonglou Sapo 76296-72-5 20mg 訂購(gòu)|咨詢

重樓皂苷I;Chonglou Sapon 50773-41-6 20mg 訂購(gòu)|咨詢

粗莖烏頭堿甲;Crassicauline 79592-91-9 20mg 訂購(gòu)|咨詢

橙黃Ⅳ;Orange IV 554-73-4 20mg 訂購(gòu)|咨詢

橙黃Ⅱ;Orange Ⅱ 633-96-5 20mg 訂購(gòu)|咨詢

操作步驟(僅供參考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定，使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍，使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品：  
a,細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解，可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，低速離心取上清，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
b,血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，用生理鹽水10倍稀釋后， 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，尿液通常也可以直接用于測(cè)定，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
c,全血樣品：收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi)，顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次，用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min，棄上清，沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  
e,高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  
3、 CAT檢測(cè)：按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度，分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì)，亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè)，但如果有條件，盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零，讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。