操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:ATP含量測試盒
規(guī)格:100管/48樣
測試方法:比色法
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
激活素受體1C抗體英文名稱:Activin A Receptor Type IC 0.2ml 生長調(diào)節(jié)致癌基因α/ 素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒 GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit
富含半胱氨酸分泌蛋白3抗體英文名稱:CRISP3 0.2ml 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒 RNP-Ab ELISA Kit
RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體英文名稱:RRAGC 0.2ml
膽固醇27α羥化酶抗體英文名稱:CYP27A1 0.2ml 粘蛋白13(MUC13)ELISA試劑盒 MUC13 ELISA Kit
延伸因子EF-1δ抗體英文名稱:EEF1D 0.2ml 糖原磷酸化酶M(PYGM)ELISA試劑盒 PYGM ELISA Kit
棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶GODZ抗體英文名稱:GODZ 0.2ml 加帽酶2(DCP2)ELISA試劑盒 DCP2 ELISA Kit
γ氨基丁酸受體相關(guān)蛋白樣1抗體英文名稱:GABARAPL1 0.2ml 谷胱甘肽過氧化酶5(GPX5)ELISA試劑盒 GPX5 ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白202抗體英文名稱:IFI-202 0.2ml 白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒 IL28A ELISA Kit
層粘連蛋白β2抗體英文名稱:Laminin Beta 2 0.2ml Ⅻ型膠原(COL12)ELISA試劑盒 COL12 ELISA Kit
核因子κB抑制蛋白β抗體英文名稱:IKB beta 0.2ml
P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體英文名稱:PAK6 0.1ml
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體英文名稱:phospho-MEK2(Ser226) 0.1ml
脫氫膽固醇還原酶14抗體英文名稱:TM7SF2 0.2ml
S100鈣結(jié)合蛋白A6抗體英文名稱:S100A6 0.1ml
堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗雞IgGRabbit Anti-chicken IgG/AP 0.1ml
活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原ATF6(activating transcription factor 6) 0.5mg
ATP含量測試盒白果雙黃酮;Bilobetin 521-32-4 20mg 訂購|咨詢
3-表熊果酸;3-Epiursolic 989-30-0 20mg 訂購|咨詢
(-)-白雀木醇;L-Quebrachi 642-38-6 10mg 訂購|咨詢
八氫姜黃素;octahydrocurcu 36062-07-4 20mg 訂購|咨詢
白楊素-7-葡萄糖醛酸苷;Chrysin 20mg 訂購|咨詢
白頭翁皂苷D;Pulsatilla sa 68027-15-6 20mg 訂購|咨詢
半齒澤蘭素;Bulk Inquiry 855-96-9 20mg 訂購|咨詢
苯并黃素;alpha-Naphthofl 604-59-1 20mg 訂購|咨詢
白皮杉醇;Piceatannol 10083-24-6 20mg 訂購|咨詢
白蠟樹精;Fraxinol 486-28-2 20mg 訂購|咨詢