操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當(dāng)細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:NADPH-細胞色素C還原酶(NCR)測試盒
規(guī)格:50T/48樣
測試方法:比色法
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
甲精結(jié)合蛋白3抗體英文名稱:FNBP3 0.1ml 凝血因子Ⅹ(F10)ELISA試劑盒 F10 ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體77抗體英文名稱:GPR77 0.2ml 核糖核酸酶A8(RNASE8)ELISA試劑盒 RNASE8 ELISA Kit
IKK復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體英文名稱:IKAP 0.1ml 補體成分1q子成分A(C1qA)ELISA試劑盒 C1qA ELISA Kit
鈣粘蛋白家族成員7抗體英文名稱:FAT 0.1ml 磷脂酶D3(PLD3)ELISA試劑盒 PLD3 ELISA Kit
腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體英文名稱:NETO1 0.2ml
泛素連接酶抗體英文名稱:PIRH2 0.1ml
神經(jīng)特異性蛋白抗體英文名稱:Reticulon 1 0.2ml
TANK抗體英文名稱:TANK 0.1ml
蛇毒巴曲酶抗體英文名稱:Batroxobin Protein 0.2ml 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)ELISA試劑盒 ERP29/C12orf8/ERP28 ELISA Kit
Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 0.1ml
AEG-1抗原AEG-1 peptide 0.5mg
Smad4抗原Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4) 0.5mg
蘇云金芽孢桿 蛋白Bacillus thuringiensis,BT ELISA Kit 96T
人足細胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白PCX(Human Podocalyxin) ELISA Kit 96T
大鼠干細胞因子受體SCFR ELISA Kit 96T
人細胞抗原6復(fù)合物基因座ALy6a(Human lymphocyte antigen 6 complex locus A) ELISA Kit 96T
NADPH-細胞色素C還原酶(NCR)測試盒纖精酮 567-75-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
沃塔紫杉醇 186348-23-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
脫氫雌馬酚 81267-65-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
山梗菜堿 90-69-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
去甲二氫愈創(chuàng)木酸 500-38-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
尼替西農(nóng) 104206-65-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
米托拉酮 87626-55-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
美格魯特 72599-27-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
毛果蕓香堿 92-13-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
羅希吐堿 71294-60-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢