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產(chǎn)品名稱:堿性磷酸酶染液
規(guī)格:可染20~30張片
測(cè)試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
補(bǔ)體C2b鏈多肽抗體英文名稱:C2b 0.1ml 肝素結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)ELISA試劑盒 HBEGF ELISA Kit
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框152抗體英文名稱:C20orf152 0.2ml 干擾素調(diào)節(jié)因子8(IRF8)ELISA試劑盒 IRF8 ELISA Kit
血小板因子4抗體英文名稱:CXCL4/PF4 0.1ml 組蛋白脫乙?;?(HDAC1)ELISA試劑盒 HDAC1 ELISA Kit
液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體英文名稱:Chorein/VPS13A 0.1ml 信號(hào)素3D(SEMA3D)ELISA試劑盒 SEMA3D ELISA Kit
磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體英文名稱:phospho-ECT2 (Thr373) 0.1ml 神經(jīng)連接蛋白1(NLGN1)ELISA試劑盒 NLGN1 ELISA Kit
堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/AP 0.1ml
人乙肝表面抗原抗體(包被)英文名稱:HBsAg 0.1ml 耳蝶呤3(OTOP3)ELISA試劑盒 OTOP3 ELISA Kit
線粒體核糖體蛋白L12抗體英文名稱:MrpL12 0.1ml Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒 COL1α2 ELISA Kit
線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體英文名稱:MtTF1 0.2ml
少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子1英文名稱:OLIG1 0.2ml
G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y6抗體英文名稱:P2Y6 0.1ml
微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體英文名稱:TBCE 0.2ml
EBV核蛋白2抗體英文名稱:WAPL 0.2ml
驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG 1mg
核凋亡因子THAP1抗體英文名稱:THAP1 0.2ml
乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 0.5mg
堿性磷酸酶染液巖大戟內(nèi)酯B 37905-08-1 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
野馬追內(nèi)酯B 877822-40-7 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
去甲澤拉木醛 107316-88-1 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
人參皂苷F3 62025-50-7 HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
萊苞迪甙D 63279-13-0 HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
萊苞迪甙C 63550-99-2 HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
羌活醇 88206-46-6 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
胡蘿卜苷 474-58-8 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
櫟櫻酸 6812-81-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
七葉膽苷XVII 80321-69-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。