操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:TTC染液
規(guī)格:10ml裝,可染約20-30張
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
小鼠血漿α顆粒膜蛋白GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) ELISA Kit 96T
磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體英文名稱:Phospho-Bad (Ser134) 0.1ml 葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 GIP ELISA Kit
20號染色體開放閱讀框144抗體英文名稱:C20ORF144 0.2ml 干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 SCF/MGF ELISA Kit
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體英文名稱:CHCHD6 0.2ml 原鈣黏素21(PCDH21)ELISA試劑盒 PCDH21 ELISA Kit
磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體英文名稱:Phospho-CD18 (Thr758) 0.1ml 信號素4B(SEMA4B)ELISA試劑盒 SEMA4B ELISA Kit
羅丹明標(biāo)記的兔抗猴IgGRabbit Anti-Monkey IgG/RBITC 0.3ml
蛋白激酶A調(diào)節(jié)亞基a1抗體英文名稱:PRKAR1 0.1ml
磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體英文名稱:phospho-RGS19(Ser24) 0.1ml
轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白1抗體英文名稱:TBRG1 0.2ml
琥珀酸細(xì)胞色素亞基B560抗體英文名稱:SDHC 0.2ml
RASSF5抗體英文名稱:RASSF5 0.2ml
人骨保護(hù)素OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 96T
芳香基硫酸酯酶F抗體英文名稱:ARSF 0.2ml 轉(zhuǎn)錄因子1(AP-1)ELISA試劑盒 AP-1 ELISA Kit
鈣離子ATP酶通道蛋白抗體英文名稱:ATP2c1 0.2ml 乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒 BRCA-1 ELISA Kit
膜糖蛋白CD200抗體英文名稱:CD200 0.1ml 核轉(zhuǎn)錄因子κBp65(NFκBp65)ELISA試劑盒 NFκBp65 ELISA Kit
外紡錘體極樣蛋白1抗體英文名稱:Separase 0.1ml
TTC染液牡荊素鼠李糖苷 64820-99-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
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馬錢苷酸 22255-40-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
新橙皮苷二氫查爾酮 20702-77-6 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
白當(dāng)歸腦 26091-79-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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(R型)人參皂苷Rg2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
莫諾苷 25406-64-8 HPLC≥97%;20mg 訂購|咨詢
山茱萸苷 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢