操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱:caspase-6活性檢測(cè)試劑盒(分光光度法)
規(guī)格:20T、50T、100T
測(cè)試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
小鼠抗單核細(xì)胞抗體AMA(Mouse anti-Monocyte antibody) ELISA KIT 96T
人抗細(xì)胞球蛋白ALG(Human anti-lymphocyte globulin) ELISA Kit 96T
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體英文名稱:CaMK2 alpha 0.1ml 延伸蛋白A3(ELOA3)ELISA試劑盒 ELOA3 ELISA Kit
Ephrin A2抗體英文名稱:Ephrin A2 0.1ml 酸性葡糖苷酶α(GαA)ELISA試劑盒 GαA ELISA Kit
富含絲氨酸/精氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)蛋白抗體英文名稱:FUSIP1 0.2ml 細(xì)胞抗原9(LY9)ELISA試劑盒 LY9 ELISA Kit
磷酸化組蛋白去乙?;?/span>4/5/7抗體英文名稱:Phospho-HDAC4 (Ser246) + HDAC5 (Ser259) + HDAC7 (Ser155) 0.1ml 肝受體同源物1(LRH1)ELISA試劑盒 LRH1 ELISA Kit
DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體英文名稱:FANCG 0.1ml 磷脂酶A1(PLA1)ELISA試劑盒 PLA1 ELISA Kit
鋅指蛋白909抗體英文名稱:ZBTB1 0.2ml
Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml
PE-Cy3標(biāo)記的驢抗兔IgGDonkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 0.1ml
凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體LOX-1/OLR1 0.5mg
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體英文名稱:GGT6 0.2ml 角蛋白3(KRT3)ELISA試劑盒 KRT3 ELISA Kit
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白8抗體英文名稱:CtIP 0.2ml 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 TRACP-5b ELISA Kit
磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體英文名稱:Phospho-Caspase-9 (Thr125) 0.1ml 白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 IL-33 ELISA Kit
分支酶GBE1抗體英文名稱:GBE1 0.2ml 著絲粒蛋白32(CENP32)ELISA試劑盒 CENP32 ELISA Kit
DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體英文名稱:DDIT4 0.1ml 停靠蛋白3(DOK3)ELISA試劑盒 DOK3 ELISA Kit
caspase-6活性檢測(cè)試劑盒(分光光度法)MEM培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)鹽酸氮卓斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Azelastine HCl 79307-93-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
M199培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)阿奇霉素 Azithromycin 117772-70-0 質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二水物
GMEM培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)阿奇霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Azithromycin 117772-70-0 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
DMEM/F12培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)氨曲南 Aztreonam 78110-38-0 質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BR
McCOY’S 5A培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)氨曲南(標(biāo)準(zhǔn)品) Aztreonam 78110-38-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品
LEIBOVITZ’S L15培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)巴卡丁 III Baccatin III 27548-93-2 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
ISCOVE’S MDM培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)巴卡丁 III(標(biāo)準(zhǔn)品) Baccatin III 27548-93-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
GRACE’S 昆蟲培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1/10升(片劑)巴氯芬 Baclofen 1134-47-0 質(zhì)量規(guī)格:純度>99,USP
胚胎干細(xì)胞(ES)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:500毫升巴氯芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Baclofen 1134-47-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)完全培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:500毫升巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Balofloxacin Dihydrate 151060-21-8 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品
胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)因子 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:5/10/50毫升巴洛沙星 Balofloxacin Dihydrate 151060-21-8 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98.5%,BR,二水合物
胚胎干細(xì)胞基質(zhì)膠溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10毫升鹽酸苯達(dá)莫司汀 Bendamustine HCl 3543-75-7 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%
胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:100毫升鹽酸苯達(dá)莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Bendamustine HCl 3543-75-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人體胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:100毫升倍他米松 Betamethasone 378-44-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%