操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時內檢測完畢。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:凋亡細胞富集試劑盒
規(guī)格:20T
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
平滑肌鈣調蛋白CNN2抗體英文名稱:CNN2 0.2ml 補體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒 C5b ELISA Kit
磷酸化B細胞銜接分子DAPP1抗體英文名稱:phospho-DAPP1 (Tyr139) 0.1ml 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒 DNASE1 ELISA Kit
DNA損傷結合蛋白1抗體英文名稱:DDB1 0.2ml 唾液富組蛋白3(HTN3)ELISA試劑盒 HTN3 ELISA Kit
糖皮質 誘導亮氨酸拉鏈蛋白抗體英文名稱:GilZ 0.2ml 人抗Ⅱ型膠原蛋白抗體(Anti-CⅡAb)ELISA試劑盒 Anti-CⅡAb ELISA Kit
β葡萄糖苷酶2抗體英文名稱:GBA2 0.2ml 核仁蛋白14(NOL14)ELISA試劑盒 NOL14 ELISA Kit
IgLON家族蛋白5抗體英文名稱:IGLON5 0.2ml 表面活性物質關聯(lián)蛋白B(SPB)ELISA試劑盒 SPB ELISA Kit
金標記兔抗地高辛 (10nm/15nm)Rabbit Anti-digoxin/Gold 0.5ml
痛覺調節(jié)肽NPFF抗體英文名稱:NPFF 0.2ml
RAN結合蛋白1抗體英文名稱:RanBP1 0.2ml
RAN GTPase酶激活蛋白1抗體英文名稱:RanGAP1 0.2ml
共濟失調擴張癥D相關蛋白抗體英文名稱:TRIM29 0.1ml
多重表皮生長因子樣蛋白4抗體英文名稱:Slit1 0.2ml
Cy5標記的小鼠抗人IgMMouse Anti-human IgM/Cy5 0.1ml
腎上腺素能受體β3ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 0.5mg
類泛素蛋白SUMO 0.5mg
Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5.5 0.1ml
凋亡細胞富集試劑盒BrdU標記法細胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:10/20次地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷(標準品) Decitabine 2353-33-5 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:100次5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷 5-Aza-2′-deoxycytidine 2353-33-5 質量規(guī)格:>97%,進分sigma貨號A3656
酸性磷酸酶(AP)活力法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:100次醋酸德舍瑞林 Deslorelin Acetate 57773-65-6 質量規(guī)格:>99%,BR
葡萄糖耗損法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:500次去氨加壓素;去氨壓素 Desmopressin Acetate 16789-98-3;16679-58-6(base) 質量規(guī)格:>98%,BR,醋酸鹽形式
紅色熒光細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:500次莫匹羅星,假單胞酸 Mupirocin 12650-69-0 質量規(guī)格:>920U/MG,USP
磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B)細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:100次匹伐他汀叔丁酯 Tert-buthyl Pitavastatin 586966-54-3 質量規(guī)格:>97%
考馬斯亮藍細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:500次多烯紫杉醇無水/多西他賽 Docetaxel anhydrous 114977-28-5 質量規(guī)格:purity>99.0%,BR
XTT比色法細胞繁殖測定試劑盒 進口/國產 規(guī)格:500次多烯紫杉醇無水/多西他賽(標準品) Docetaxel anhydrous 114977-28-5 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
水溶性四氮唑-1 比色法細胞繁殖測定試劑盒 進口/國產 規(guī)格:500次多烯紫杉醇三水合物 Docetaxel trihydrate 148408-66-6 質量規(guī)格:含量>99.0%
水溶性四氮唑-8 比色法細胞繁殖測定試劑盒 進口/國產 規(guī)格:500次多烯紫杉醇三水(標準品) Docetaxel trihydrate 148408-66-6 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
酚藏花紅(PHENOSAFRANINE)植物細胞繁殖測定試劑盒 進口/國產 規(guī)格:100次鹽酸多奈哌齊III型 Donepezil HCl 120011-70-3 質量規(guī)格:>99%,III型
二乙酸熒光素(Fluorescein diacetate)植物細胞繁殖測定試劑盒 進口/國產 規(guī)格:100次鹽酸多奈哌齊III型(標準品) Donepezil HCl 120011-70-3 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
伊文思藍(EVANS BLUE)植物細胞繁殖測定試劑盒 進口/國產 規(guī)格:100次達馬莫德 Doramapimod 285983-48-4 質量規(guī)格:含量>98.5%,類白色粉末
蟲卵細胞活力和死亡熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:50次鹽酸多佐胺;鹽酸杜塞酰胺 Dorzolamide HCl 130693-82-2 質量規(guī)格:>99%,USP31