操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱(chēng):蛋白電泳預(yù)制膠(10-20%,10孔)
規(guī)格:10塊/盒
測(cè)試方法:
客戶(hù)自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 0.5mg
促腎上腺皮質(zhì) (7-23)(抗原)ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 0.2mg
磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原glypican 1 0.5mg
熒光素PE-Cy3標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照)Goat IgG/PE-Cy3 0.1ml
小鼠硫氧化還原蛋白Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 96T
雞傳染性法氏囊病病毒抗體英文名稱(chēng):IBDV 1ml Vertnin蛋白(VRTN)ELISA試劑盒 VRTN ELISA Kit
人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit 96T
共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體英文名稱(chēng):A2BP1 0.2ml 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 TGF-β1 ELISA Kit
alpha 1腎上腺素能受體A抗體英文名稱(chēng):ADRA1A 0.1ml 肉瘤抗原1(SAGE1)ELISA試劑盒 SAGE1 ELISA Kit
癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體英文名稱(chēng):CD66c 0.1ml 核糖核酸抑止劑(RNH1/PRI/RNH)ELISA試劑盒 RNH1/PRI/RNH ELISA Kit
人凝血因子ⅫF XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit 96T
21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體英文名稱(chēng):C21orf54 0.2ml 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)ELISA試劑盒 ADAMTS5 ELISA Kit
烯酰輔酶A水合酶1抗體英文名稱(chēng):ECH1 0.2ml 矢車(chē)菊苷β1(CENTβ1)ELISA試劑盒 CENTβ1 ELISA Kit
甘氨酸受體alpha 1/2/3型抗體英文名稱(chēng):GlyR alpha 1 + 2 + 3 0.1ml 精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒 Sp17 ELISA Kit
乙酰肝素酶抗體英文名稱(chēng):Heparanase 1 0.1ml 紡錘體蛋白2(SPIN2)ELISA試劑盒 SPIN2 ELISA Kit
蛋白電泳預(yù)制膠(10-20%,10孔)真/酵母細(xì)胞活性線粒體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次美羅培南 Meropenem trihydrate 119478-56-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三水合物
真/酵母細(xì)胞高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次美羅培南(標(biāo)準(zhǔn)品) Meropenem trihydrate 119478-56-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,三水合物
純化線粒體蛋白質(zhì)濃度定量測(cè)定試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次硫酸卡那霉素 Kanamycin mono sulfate 25389-94-0 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)≥750IU/MG,BP,BR
動(dòng)物血小板線粒體粗提分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次硫酸卡那霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Kanamycin mono sulfate 25389-94-0 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
動(dòng)物血小板活性線粒體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次酮舍林酒石酸鹽 Ketanserin Tartrate 83846-83-7 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
動(dòng)物血小板高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次酮舍林酒石酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketanserin Tartrate 83846-83-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
動(dòng)物全血線粒體粗提分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次酮康唑 Ketoconazole 65277-42-1 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
動(dòng)物全血活性線粒體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次酮康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketoconazole 65277-42-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
動(dòng)物全血高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次吉他霉素,柱晶白霉素 Kitasamycin 1392-21-8 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)≥1300U/MG,BR
純化線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次拉坦前列腺素 Latanoprost 130209-82-4 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%
動(dòng)物硬組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次來(lái)那度胺/雷利度胺 Lenalidomide 191732-72-6 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR
動(dòng)物軟組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次來(lái)那度胺/雷利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Lenalidomide 191732-72-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
動(dòng)物細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次來(lái)曲唑 Letrozole 112809-51-5 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
真/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次來(lái)曲唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Letrozole 112809-51-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品