【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:蛋白上樣緩沖液(非還原,5×)
規(guī)格:10ml
測(cè)試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
葡萄糖-6-磷酸酶3/G6Pase-β抗體英文名稱:G6PC3 0.2ml 核糖核酸酶A11(RNASE11)ELISA試劑盒 RNASE11 ELISA Kit
腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體英文名稱:APC2 0.2ml 糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒 GSP ELISA Kit
嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體英文名稱:VAT1 0.1ml
超氧化物歧化酶3抗體英文名稱:SOD3 0.1ml
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/PE-Cy7 0.1ml
防御素β1抗原Defensin Beta1 0.5mg
磷酸化Bcl-xL(Ser62)抗體英文名稱:phospho-Bcl-xL (Ser62) 0.1ml 磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)ELISA試劑盒 PITPNB ELISA Kit
磷酸化B-Raf抗體英文名稱:phospho-B Raf (Thr753) 0.1ml 硫酸腦苷酯(SFT)ELISA試劑盒 SFT ELISA Kit
殺 肽B/天蠶抗 肽B抗體英文名稱:Cecropin B 0.2ml 蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒 PTP/PTPase/CD148 ELISA Kit
CD23/FcεRII抗體英文名稱:CD23 0.1ml 白細(xì)胞介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 IL-12/P70 ELISA Kit
EFHA1蛋白抗體英文名稱:EFHA1 0.1ml 失調(diào)蛋白1(ATXN1)ELISA試劑盒 ATXN1 ELISA Kit
生物素標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGDonkey Anti-Guinea pig IgG/Bio 0.1ml
磷脂酰基醇蛋白聚糖-6抗體英文名稱:Glypican 6 0.2ml 肌間蛋白2(MYOM2)ELISA試劑盒 MYOM2 ELISA Kit
肝細(xì)胞生長因子抗體英文名稱:HGF 0.1ml 簇集蛋白(CLU)ELISA試劑盒 CLU ELISA Kit
MD-1蛋白抗體英文名稱:MD1 0.1ml Goosecoid2蛋白(GSC2)ELISA試劑盒 GSC2 ELISA Kit
微小染色體維持缺陷蛋白7抗體英文名稱:MCM7 0.1ml
蛋白上樣緩沖液(非還原,5×)紅細(xì)胞膜脂質(zhì)成分分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次利福噴丁(標(biāo)準(zhǔn)品) Rifapentine 61379-65-5 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
人體血小板粗提分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次利魯唑 Riluzole 1744-22-5 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人體血小板高純分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次(5毫升/次)利魯唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Riluzole 1744-22-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EDTA二鉀血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升地拉羅司,去鐵斯若 Deferasirox 201530-41-8 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%
EDTA三鉀血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升地拉羅司(標(biāo)準(zhǔn)品) Deferasirox 201530-41-8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EDTA鈉血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升利培酮 Risperidone 106266-06-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
ACD血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升利培酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Risperidone 106266-06-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
肝素鈉血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升利托那韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Ritonavir 155213-67-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
OXALATE(鈉鹽)血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升利托那韋 Ritonavir 155213-67-5 質(zhì)量規(guī)格:>99%
OXALATE(鉀鹽)血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升羅格列酮堿 Rosiglitazone base 122320-73-4 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%
OXALATE(氨鹽)血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升羅格列酮堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosiglitazone base 122320-73-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
OXALATE(氨鉀鹽)血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升馬來酸羅格列酮 Rosiglitazone Maleate 155141-29-0 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
FLUORIDE血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升馬來酸羅格列酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosiglitazone Maleate 155141-29-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
OXALATE/FLUORIDE混合血液抗凝液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升降鈣素;醋酸鮭魚降鈣素 Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin) 47931-85-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。