操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:AEC顯色試劑盒
規(guī)格:盒
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體英文名稱:Phospho-PLK1 (Ser137) 0.1ml
線粒體二羧酸載體蛋白抗體英文名稱:SLC25A10 0.2ml
SAMD7蛋白抗體英文名稱:SAMD7 0.2ml
兔抗牛IgG抗血清Rabbit anti-Bovine IgG whole serum 1ml
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgGRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 488 0.1ml
插頭蛋白M1抗原FOXM1/HFH 11 peptide 0.5mg
熒光素標(biāo)記狗IgGdog IgG/FITC 0.3ml
T細(xì)胞特異性趨化因子抗體英文名稱:RANTES 0.1ml
人封閉抗體BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 96T
人環(huán)磷酸鳥苷cGMP(Human Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 96T
磷酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體英文名稱:phospho-ASK1 (Thr845) 0.1ml 組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA試劑盒 H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit
β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體英文名稱:beta-Amyloid 1-40 (CT) 0.1ml 沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 CPAF ELISA Kit
神經(jīng)性舞蹈病蛋白抗體英文名稱:Huntingtin 0.1ml 成纖維細(xì)胞生長因子3(FGF3)ELISA試劑盒 FGF3 ELISA Kit
磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體英文名稱:phospho-CK18(Ser60) 0.1ml NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)ELISA試劑盒 NOX3/MOX2 ELISA Kit
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體英文名稱:COPS4 0.2ml 血型糖蛋白C(GYPC)ELISA試劑盒 GYPC ELISA Kit
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體英文名稱:phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204) 0.1ml 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1(RB1)ELISA試劑盒 RB1 ELISA Kit
AEC顯色試劑盒冰凍切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次PD0325901 PD-0325901 391210-10-9 質(zhì)量規(guī)格:>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑
石蠟切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次西他塞坦鈉/司他生坦鈉 Sitaxsentan sodium; TBC-11249; Thelin 210421-74-2 質(zhì)量規(guī)格:純度99%
載玻片細(xì)胞CASPASE-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次西他塞坦鈉/司他生坦鈉 Sitaxsentan sodium; TBC-11250; Thelin 210421-74-2 質(zhì)量規(guī)格:純度99%
冰凍切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次西他塞坦鈉/司他生坦鈉 Sitaxsentan sodium; TBC-11251; Thelin 210421-74-2 質(zhì)量規(guī)格:純度99%
石蠟切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸 Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid 60239-18-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%
細(xì)胞CASPASE-2蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次拉米夫定 Lamivudine 134678-17-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,USP可用于細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞CASPASE-2蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品) Lamivudine 134678-17-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
CASPASE-2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次鹽酸三氟拉嗪 Trifluoperazine dihydrochloride 440-17-5 質(zhì)量規(guī)格:>99%
CASPASE-2蛋白免共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次鹽酸三氟拉嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Trifluoperazine dihydrochloride 440-17-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CASPASE-2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次皮質(zhì)甾酮/腎上腺酮 Corticosterone 50-22-6 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%
細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次皮質(zhì)甾酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Corticosterone 50-22-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
載玻片細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次二硫化四乙基秋蘭姆 Disulfiram 97-77-8 質(zhì)量規(guī)格:>97%
冰凍切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次雙硫侖(標(biāo)準(zhǔn)品) Disulfiram 97-77-8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
石蠟切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次楊梅素/楊梅酮 Myricetin 529-44-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95.0%,BR