【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:2×Es Taq MasterMix(Dye)
規(guī)格:5ml
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
核受體輔助抑制因子1抗體英文名稱:NCoR1 0.1ml
骨橋蛋白/分泌型磷蛋白1抗體英文名稱:osteopontin 0.1ml
磷酸化突觸后密度蛋白95抗體英文名稱:Phospho-PSD95 (Tyr236 + Tyr240) 0.1ml
沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體英文名稱:SIRT7 0.2ml
A型流感病毒核衣殼蛋白抗體英文名稱:H1N1+H5N1+H3N2 nucleocapsid protein 0.1ml 泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)ELISA試劑盒 UBE2C ELISA Kit
分選連接蛋白2抗體英文名稱:SNX2 0.2ml
壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體英文名稱:TNFAIP8 0.2ml
富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗體英文名稱:SPARC 0.1ml
APC標(biāo)記的羊抗大鼠IgGGoat Anti-rat IgG/APC 0.1ml
KB抑制蛋白激酶γ抗體英文名稱:IKK gamma 0.2ml 白介素1θ(IL1θ)ELISA試劑盒 IL1θ ELISA Kit
人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit 96T
載脂蛋白E3抗體英文名稱:APOE3 0.2ml 水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒 AQP-0 ELISA Kit
鈣調(diào)蛋白激酶激酶α抗體CaMKKα英文名稱:CaMKK1 0.1ml 甲胺喋呤(MTX)ELISA試劑盒 MTX ELISA Kit
β鏈接素相互作用蛋白1抗體英文名稱:CTNNBIP1 0.1ml G蛋白偶聯(lián)受體109A(GPR109A)ELISA試劑盒 GPR109A ELISA Kit
kappa型受體抗體英文名稱:kappa Opioid receptor 0.1ml Hornerin蛋白(HRNR)ELISA試劑盒 HRNR ELISA Kit
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體英文名稱:Phospho-MKP1 (Ser318) 0.1ml
2×Es Taq MasterMix(Dye)活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次磷酸三丁酯(CP) Tributyl phosphate 126-73-8 質(zhì)量規(guī)格:CP
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次磷酸三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Tributyl phosphate 126-73-8 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑) Bentonite 1302-78-9 質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑) Bentonite 1302-78-9 質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-2,適于中高極性溶劑
活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶13(CASPASE-13)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:AR,200目,粉末狀,褐色
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶13(CASPASE-13)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:CP,200目,粉末狀,褐色
活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭顆粒(AR,20-50目) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:AR,20-50目
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次活性炭(電鍍脫色專用,200目,from wood) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:電鍍脫色專用,200目,from wood
活體細(xì)胞組織蛋白酶L(CATHEPSIN L)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭(催化劑載體專用,8-16目) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:催化劑載體專用,8-16目
冰凍切片組織蛋白酶L(CATHEPSIN L)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭(凈水、氣體純化專用,棒,φ1.0mm) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體純化專用,棒,φ1.0mm
活體細(xì)胞組織蛋白酶K(CATHEPSIN K)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭(凈水、氣體純化專用,10-24目) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體純化專用,10-24目
冰凍切片組織蛋白酶K(CATHEPSIN K)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭(電鍍脫色專用,40-60目,from Nutshell) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:電鍍脫色專用,40-60目,from Nutshell
活體細(xì)胞組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭(凈水、氣體純化專用,棒,φ4.0mm) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體純化專用,棒,φ4.0mm
冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次活性炭(**脫色,200目) Activated charcoal 7440-44-0 質(zhì)量規(guī)格:**脫色,200目
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。