操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱:UltraSYBR Mixture (High ROX)
規(guī)格:5ml
測(cè)試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴胺受體相互作用蛋白4抗體英文名稱:PDC6I 0.2ml
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ)英文名稱:TGF beta Receptor II 0.2ml
WDR91蛋白抗體英文名稱:WDR91 0.1ml
磷酸化抑制基因P53抗體英文名稱:phospho-P53(Ser46) 0.1ml
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488 0.1ml
流感病毒A抗原H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 0.5mg
(親和純化) 羊IgMGoat IgM 1mg
大鼠載脂蛋白EApo-E ELISA Kit 96T
9號(hào)染色體開放閱讀框114抗體英文名稱:C9orf114 0.2ml 促?;鞍?ASP)ELISA試劑盒 ASP ELISA Kit
人己糖激酶3HK3(Human hexokinase 3) ELISA Kit 96T
自噬相關(guān)蛋白10抗體英文名稱:Apg10 0.2ml 乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒 ALDH ELISA Kit
β淀粉樣肽(25-35)抗體英文名稱:beta-Amyloid(25-35) 0.1ml 熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 HSP gp96 ELISA Kit
緊密連接蛋白4抗體英文名稱:Claudin 4 0.1ml 過(guò)氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒 PPARGC1 ELISA Kit
磷酸化原癌基因c-Jun抗體英文名稱:phospho-c-Jun(Thr249) 0.1ml Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)ELISA試劑盒 EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137 ELISA Kit
9號(hào)染色體開放閱讀框116抗體英文名稱:C9orf116 0.2ml 血紅蛋白θ1(HBθ1)ELISA試劑盒 HBθ1 ELISA Kit
磷酸化叉頭蛋白4抗體英文名稱:phospho-FOXO4 (Ser262) 0.1ml 尿嘧啶核苷磷酸化酶2(UPP2)ELISA試劑盒 UPP2 ELISA Kit
UltraSYBR Mixture (High ROX)組織巨噬細(xì)胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次速滅威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Tsumacide solution 1129-41-5 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
破骨細(xì)胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次嗪氨靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Triforin 26644-46-2 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
丸型酸性磷酸酶(TACP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次三唑磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC)) Triazophos 24017-47-8 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC)
細(xì)胞果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次蟲酰肼(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Tebufenozide 112410-23-8 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
組織果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次甲基立枯磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%) Tolclofos-methyl 57018-04-9 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
血液果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次殺蟲單(標(biāo)準(zhǔn)品) Thiosultap disodium 52207-48-4 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
植物果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次綠草定(標(biāo)準(zhǔn)品) Triclopyr 55335-06-3 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
葡萄糖一6一磷酸脫氫酶(G6PD)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50次雙硫磷(標(biāo)準(zhǔn)品) Temephos 3383-96-8 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
通用型谷氨酸酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%) Trifluralin solution 1582-09-8 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%
細(xì)胞谷氨酸酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次殺蟲脲(標(biāo)準(zhǔn)品) Triflumuron 64628-44-0 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
組織谷氨酸酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次戊隆(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%) Pencycuron 66063-05-6 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
血液谷氨酸酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%) Hexythiazox solution 78587-05-0 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
體液谷氨酸酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Hexythiazox solution 78587-05-0 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
通用型谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Imazalil solution 35554-44-0 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%