【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:UltraSYBR One Step RT-qPCR Kit (High ROX)
規(guī)格:100次
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體英文名稱:AHI1 0.2ml 腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 ADRA1A ELISA Kit
結(jié)締組織生長因子抗體英文名稱:CTGF 0.1ml 基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒 LUM ELISA Kit
1號染色體開放閱讀框112抗體英文名稱:C1orf112 0.2ml 中間α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)ELISA試劑盒 ITIH1 ELISA Kit
細胞角蛋白5+6抗體英文名稱:CK5+6 0.1ml 眼皮膚白化?、虻鞍?OCA2)ELISA試劑盒 OCA2 ELISA Kit
12號染色體開放閱讀框68抗體英文名稱:C12ORF68 0.2ml 補體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)ELISA試劑盒 CFHR1 ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體171抗體英文名稱:GPR171 0.2ml 人抗藥蛋白(SRI)ELISA試劑盒 SRI ELISA Kit
同源盒蛋白HOXA9抗體英文名稱:HOXA9 0.1ml 復(fù)合素1(CPLX1)ELISA試劑盒 CPLX1 ELISA Kit
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體英文名稱:IGFBP6 0.2ml TNF受體關(guān)聯(lián)因子3(TRAF3)ELISA試劑盒 TRAF3 ELISA Kit
金屬硫蛋白3抗體英文名稱:Metallothionein 3 0.2ml
促胃泌素釋放肽(抗原)GRP( Gastrin Releasing Peptide ) 0.5mg
蛋白酶體PSMβ7抗體英文名稱:Proteasome 20S beta 7 0.2ml
微管蛋白γ/Tubulin γ抗體英文名稱:gamma tubulin (Centrosome Marker ) 0.1ml
泛素硫酯酶L3抗體英文名稱:UCHL3 0.2ml
視黃酸激活基因8抗體英文名稱:Stra8 0.1ml
副綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體英文名稱:HuC 0.1ml 泛核蛋白2(UBN2)ELISA試劑盒 UBN2 ELISA Kit
細胞角蛋白18(多肽)CK18(Cytokeratin 18) 0.5mg
UltraSYBR One Step RT-qPCR Kit (High ROX)血液丁酰膽堿酯酶活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次氯草定(標(biāo)準(zhǔn)品) Nitrapyrin 1929-82-4 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
體液丁酰膽堿酯酶活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次丙溴磷(標(biāo)準(zhǔn)品) Profenofos 41198-08-7 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
通用型丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次吡丙醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%) Pyriproxifen 95737-68-1 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
細胞丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次稻豐散(0.105mg/ml) Phenthoate solution 13376-78-8 質(zhì)量規(guī)格:0.105mg/ml
組織丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次敵稗標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml) Propanil solution 709-98-8 質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml
血液丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次伏殺硫磷(標(biāo)準(zhǔn)品) Phosalone 2310-17-0 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
體液丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次克螨特標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml) Propargite solution 2312-35-8 質(zhì)量規(guī)格:1.00mg/ml
苯甲酰酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次三氯殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) Plifenat solution 21757-82-4 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
銅藍蛋白活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次三氯殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Plifenat solution 21757-82-4 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
血液α-淀粉酶活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次霜霉威(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Propamocarb 24579-73-5 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
體液α-淀粉酶活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次**喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Cloquintocet-mexyl 99607-70-2 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
總膽汁酸(TBA)定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%) Chlortoluron solution 15545-48-9 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
血清/血漿總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次敵草隆(99%) Diuron 330-54-1 質(zhì)量規(guī)格:0.99
組織總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次四螨嗪(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%) Clofentezine 74115-24-5 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當(dāng)細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。