操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:miRNA熒光定量qPCR檢測
規(guī)格:125次
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
G氨基丁酸B型受體2抗體英文名稱:GABA B Receptor 2 0.1ml 谷氨酸脫氫酶(GDH)ELISA試劑盒 GDH ELISA Kit
上皮細胞特異性蛋白1抗體英文名稱:NES/KLK10 0.1ml K-乙酰轉移酶5(KAT5)ELISA試劑盒 KAT5 ELISA Kit
狂躁基因同源蛋白MFNG抗體英文名稱:Manic Fringe 0.2ml Ⅱ型前膠原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA試劑盒 PⅡNT ELISA Kit
神經(jīng)肽S抗體英文名稱:Neuropeptide S 0.2ml
RecQ解旋酶樣蛋白5抗體英文名稱:RECQL5 0.2ml
Ras樣蛋白家族10A抗體英文名稱:RASL10A 0.2ml
磷酸化微管相關蛋白抗體英文名稱:phospho-Tau protein(Thr529) 0.1ml
CD2F-10抗體英文名稱:SLAMF9 0.2ml
羅丹明標記的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/RBITC 0.1ml
CD97抗體英文名稱:CD97 0.1ml 棕櫚酰化膜蛋白5(MPP5)ELISA試劑盒 MPP5 ELISA Kit
表皮生長因子受體3(抗原)ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 0.5mg
兔血管**素2ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 96T
人膀胱腫瘤抗原BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 96T
大鼠雌二醇E2 ELISA Kit 96T
人血小板膜糖蛋白ⅣGP- IV (Human platelet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit 96T
磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體英文名稱:phospho-GEF H1 (Ser886) 0.1ml 熱休克蛋白27(HSP27)ELISA試劑盒 HSP27 ELISA Kit
miRNA熒光定量qPCR檢測糖化血清白蛋白(GSP)酶連續(xù)反應比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次辛硫磷(分析標準品,99%) Phoxim 14816-18-3 質量規(guī)格:分析標準品,99%
糖血清蛋白(GSP)化學比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次除草醚標準溶液(10μg/ml,u=5%) Nitrofen solution 1836-75-5 質量規(guī)格:10μg/ml,u=5%
糖血清蛋白(GSP)酶連續(xù)反應比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次2-萘氧乙酸(標準品) 2-Naphthoxyacetic acid 120-23-0 質量規(guī)格:分析標準品
總L-高半胱氨酸(Hcy)定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次滅丹標準溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 133-07-3 質量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
通用型高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次滅丹標準溶液(10μg/ml,u=6%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 133-07-3 質量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
細胞高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次惡草酮(分析標準品,97.5%) Oxadiazon 19666-30-9 質量規(guī)格:分析標準品,97.5%
組織高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甲基嘧啶磷(10μg/ml,u=3%) Pirimiphos-methyl solution 29232-93-7 質量規(guī)格:10μg/ml,u=3%
體液高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次撲滅津(標準品) Propazine 139-40-2 質量規(guī)格:分析標準品
細胞培養(yǎng)液高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次戊炔草胺(標準品) Propyzamide 23950-58-5 質量規(guī)格:分析標準品
通用型低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次腐霉利(標準品) Procymidon 32809-16-8 質量規(guī)格:分析標準品
細胞低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次吡蚜酮(標準品) Pymetrozin 123312-89-0 質量規(guī)格:分析標準品
組織低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次敵稗(分析標準品,98%) Propanil 709-98-8 質量規(guī)格:分析標準品,98%
體液低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次抑霉唑標準溶液(10μg/ml,u=2%) Imazalil solution 35554-44-0 質量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
細胞培養(yǎng)液低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次稻瘟靈標準溶液(10μg/ml,u=2%) Isoprothiolane solution 50512-35-1 質量規(guī)格:10μg/ml,u=2%