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產(chǎn)品名稱:?;o酶 A 氧化酶(EC1.3.3.6)
規(guī)格:1 KU/瓶
測(cè)試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體英文名稱:ENPP6 0.2ml 糖醛基-2-磺基轉(zhuǎn)移酶(UST)ELISA試劑盒 UST ELISA Kit
補(bǔ)體因子H抗體英文名稱:Factor H 0.1ml 卵質(zhì)酶2(OVCH2)ELISA試劑盒 OVCH2 ELISA Kit
高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1A抗體英文名稱:GOLT1A 0.2ml 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ2(GSTθ2)ELISA試劑盒 GSTθ2 ELISA Kit
磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體英文名稱:Phospho-IKK alpha/beta (Ser176 + Ser180) 0.1ml 白介素22受體(IL2R)ELISA試劑盒 IL2R ELISA Kit
乳酸脫氫酶LDH-C(/睪抗原32)抗體英文名稱:LDHC(Cancer,testis antigen 32) 0.1ml ⅩⅣ型膠原(COL14)ELISA試劑盒 COL14 ELISA Kit
G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB6A抗體英文名稱:RAB6A 0.2ml
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體英文名稱:PDZD7 0.2ml
反義導(dǎo)向分子RGMB抗體英文名稱:Repulsive Guidance Molecule B 0.2ml
抑癌基因5抗體英文名稱:TUSC5 0.2ml
SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體英文名稱:SET 0.1ml
CD74抗體英文名稱:CD74/MHC II 0.1ml 阻抑素2(PHB2)ELISA試劑盒 PHB2 ELISA Kit
人促黃體生成素受體抗原LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 0.5mg
谷氨酸脫羧酶-65(C端多肽)GAD-65 (glutamate decarboxylase) 0.5mg
大鼠核因子κB(NF-KapB)ELISA Kit 96T
小鼠磷脂酶A2PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit 96T
核纖層蛋白A抗原lamin A 0.5mg
?;o酶 A 氧化酶(EC1.3.3.6)組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)L-羥基脯氨酸 L-Hydroxyproline 51-35-4 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
細(xì)胞NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)L-正亮氨酸 L-Norleucine 327-57-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
組織NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20/50次(10樣本)Fmoc-D-4-碘苯丙氨酸 Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH 205526-29-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%
細(xì)胞過(guò)氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次3,5-二碘-L-酪氨酸 3,5-Diiodo-L-tyrosine 300-39-0 質(zhì)量規(guī)格:BR,98%
組織過(guò)氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次L-焦谷氨酸;氧脯氨酸 H-Pyr-OH 98-79-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
血液過(guò)氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次CBZ-L-焦谷氨酸 Z-Pyr-OH 32159-21-0 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
真/酵母過(guò)氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次DL-m-酪氨酸 DL-m-Tyrosine 775-06-4 質(zhì)量規(guī)格:0.98
植物過(guò)氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次肌氨酸甲酯鹽酸鹽 H-Sar-OMe·HCl 13515-93-0 質(zhì)量規(guī)格:BR,98%
植物NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)L-異亮氨醇 L-Isoleucinol 24629-25-2 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
酵母NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)L-亮氨醇 L-Leucinol 7533-40-6 質(zhì)量規(guī)格:>97%,油狀
真NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)N-Boc-L-亮氨醇 Boc-Leucinol 82010-31-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次L-苯丙氨醇 L-Phenylalaninol 3182-95-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
組織半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次L-色氨醇 L-Tryptophanol 2899-29-8 質(zhì)量規(guī)格:0.97
細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次Fmoc-纈氨醇 Fmoc-Valinol 160885-98-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。