操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:3α類固醇脫氫酶 (EC1.1.1.50)
規(guī)格:1KU/瓶
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計的實(shí)驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
叉頭蛋白O1抗體英文名稱:FOXO1 0.1ml 前折疊蛋白亞基6(PFDN6)ELISA試劑盒 PFDN6 ELISA Kit
線粒體甘油3磷酸?;D(zhuǎn)移酶抗體英文名稱:GPAM 0.2ml 肌間蛋白3(MYOM3)ELISA試劑盒 MYOM3 ELISA Kit
魚精蛋白P1抗體英文名稱:HSP1 0.2ml 催乳素受體(PRLR)ELISA試劑盒 PRLR ELISA Kit
P選擇素糖蛋白配體1抗體英文名稱:CD162 0.2ml
錯配修復(fù)蛋白3抗體英文名稱:MSH3 0.1ml
PUM2蛋白抗體英文名稱:Pumilio 2 0.2ml
磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體英文名稱:phospho-RAD9(Ser328) 0.1ml
三葉肽因子2抗體英文名稱:TFF2 0.1ml
腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體英文名稱:ARMETL1 0.1ml 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)ELISA試劑盒 LRP-4 ELISA Kit
膠體金標(biāo)記的兔抗豬IgGRabbit Anti-pig IgG/Gold 0.5ml
α-1抗胰糜蛋白酶AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin) 10mg
谷氨酸受體1(多肽)NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1) 0.5mg
羅丹明標(biāo)記豬IgGpig IgG/RBITC 0.3ml
內(nèi)皮素-1(多肽抗原)Endothelin-1 0.5mg
小鼠糖化血紅蛋白A1cGHbA1c(Mouse Glycated hemoglobin A1c) ELISA Kit 96T
人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 96T
3α類固醇脫氫酶 (EC1.1.1.50)組織半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素 Gastrin I,human 10047-33-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次UDPGA Na;尿苷-5'-二磷酸葡糖醛酸三鈉鹽 Uridine 5'-diphosphoglucuronic acid trisodium salt 63700-19-6 質(zhì)量規(guī)格:≥98%;美國進(jìn)口
組織半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次替卡西林,替卡西林二鈉 Ticarcillin disodium salt 4697-14-7 質(zhì)量規(guī)格:BR,二鈉鹽
細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次替卡西林(標(biāo)準(zhǔn)品) Ticarcillin disodium salt 4697-14-7 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,二鈉鹽
組織半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次RGD肽 Arg-Gly-Asp 99896-85-2 質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑
細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次肝素鋰 Heparin lithium 9045-22-1 質(zhì)量規(guī)格:>150IU/MG,BR
組織半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次促胰液素;胰泌素 Secretin Acetate 17034-35-4;108153-74-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
細(xì)胞a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次麝香草酚 Thymol 89-83-8 質(zhì)量規(guī)格:AR
組織a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次普拉洛芬 Pranoprofen 52549-17-4 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
植物a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次普拉洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Pranoprofen 52549-17-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品
真/酵母a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五 Albumin(bovine fraction V);BSA 9048-46-8 質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,分子生物學(xué)級
a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次萘啶酮酸;萘啶酸 Nalidixic acid 389-08-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%
植物β-淀粉酶(β-AMYLASE)活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元 Glycogen from oyster 9005-79-2 質(zhì)量規(guī)格:BR,>99%,河蚌提取,Type II
真/酵母β-淀粉酶(β-AMYLASE)活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次溴化乙錠(EB) Ethidium bromide(EB) 1239-45-8 質(zhì)量規(guī)格:>95%