操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:丁酰膽堿酯酶(B-CHE)活性測定試劑盒
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
2,7-二溴芘(>97.0%(GC)) 2,7-Dibromopyrene 102587-98-4 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 大米淀粉化學萃取試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,6-二溴蒽(>98.0%(HPLC)) 2,6-Dibromoanthracene 186517-01-1 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 大米淀粉生物萃取試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,6-二溴蒽醌(>95.0%(HPLC)) 2,6-Dibromoanthraquinone 633-70-5 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC) 轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定性檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴芴(>98.0%(GC)) 2,7-Dibromofluorene 16433-88-8 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC)) 2,7-Dibromo-9-fluorenone 14348-75-5 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米MON810品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴萘(>98.0%(GC)) 2,7-Dibromonaphthalene 58556-75-5 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米Bt11品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC)(T)) 2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene] 171408-84-7 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 轉(zhuǎn)基因玉米Bt176(maximizer)品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC)) 4,7-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole 15155-41-6 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米GA21品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC)) 2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene 28320-32-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 轉(zhuǎn)基因玉米T14品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,2'-二溴-9,9,-螺二[9H-芴](>95.0%(GC)) 2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene] 67665-47-8 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米T25品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴-9,9-二己基芴(>98.0%(HPLC)) 2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene 189367-54-2 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 轉(zhuǎn)基因玉米NK603品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC)) 2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene 198964-46-4 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 轉(zhuǎn)基因玉米TC1507品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,5-二溴噻唑(>97.0%(GC)) 2,5-Dibromothiazole 4175-78-4 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米CBH351(starlink)品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,5-二溴硒酚(>98.0%(GC)) 2,5-Dibromoselenophene 1755-36-8 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米MON809品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
丁酰膽堿酯酶(B-CHE)活性測定試劑盒大鼠血小板**素(TPO)ELISA試劑盒 英文名: TPO ELISA Kit
小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 英文名: AT ELISA Kit
大鼠煙堿型乙酰膽堿受體(N-AChR)ELISA試劑盒 英文名: N-AChR ELISA Kit
大鼠激肽釋放酶6(KLK6)ELISA試劑盒 英文名: KLK6 ELISA Kit
小鼠脂解激活脂蛋白受體(LSR)ELISA試劑盒 英文名: LSR ELISA Kit
大鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒 英文名: bFGF-4 ELISA Kit
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒 英文名: GLP-1 ELISA Kit
小鼠法尼酯X受體(FXR)ELISA試劑盒 英文名: FXR ELISA Kit
大鼠陽離子氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白2(CAT2)ELISA試劑盒 英文名: CAT2 ELISA Kit
小鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 英文名: LTD4 ELISA Kit
大鼠胃泌素(GAS)ELISA試劑盒 英文名: GAS ELISA Kit
大鼠白介素4(IL4)ELISA試劑盒 英文名: IL4 ELISA Kit
小鼠軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)ELISA試劑盒 英文名: CRTAP ELISA Kit
大鼠半乳糖凝集素3(Galectin3)ELISA試劑盒 英文名: Galectin3 ELISA Kit