【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！

產(chǎn)品名稱：游離脂肪酸（NEFA）含量測(cè)定試劑盒
規(guī)格：詳見(jiàn)說(shuō)明
測(cè)試方法：詳見(jiàn)說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 
常見(jiàn)樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾）。
4 ）. 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：
1、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
二苯基碘鎓六氟磷酸鹽(>97.0%(T)) Diphenyliodonium Hexafluorophosphate 58109-40-3 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)  DNA探針地高辛聚合酶整合標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 3584-23-4 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  隨機(jī)引物DNA探針地高辛聚合酶標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

三苯基溴化锍(>98.0%(T)) Triphenylsulfonium Bromide 3353-89-7 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)  PCR探針地高辛TAG聚合酶標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T)) Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 84901-27-9 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)  3′端DNA地高辛轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

1-[3-(氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N)) 1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea 23843-64-3 質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(N)  RNA探針地高辛聚合酶標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

芐?；鶡o(wú)色亞甲基蘭(>95.0%(HPLC)(T)) Benzoyl Leuco Methylene Blue 1249-97-4 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)  3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

結(jié)晶紫內(nèi)酯(>95.0%(HPLC)(T)) Crystal Violet Lactone 1552-42-7 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)  3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記鑒定試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran 21934-68-9 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)  生物素標(biāo)記封閉溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

6'-(二乙氨基)-1',2'-苯并熒烷(>98.0%(GC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',2'-benzofluoran 26628-47-7 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)  10% TWEEN 20溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T)) 2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran 34372-72-0 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)  95% TWEEN 20溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC)) 3',6'-Dimethoxyfluoran 36886-76-7 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)  10%TWEEN 80溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC)) 1,1'-Methylenedi-2-naphthol 1096-84-0 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)  10%Triton X-100溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

2-萘基芐基醚(>98.0%(GC)) Benzyl 2-Naphthyl Ether 613-62-7 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  10%Triton X-114溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

己酰胺(>98.0%(N)) Hexanamide 628-02-4 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)  10%NP-40溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

游離脂肪酸（NEFA）含量測(cè)定試劑盒小鼠腦啡肽（ENK）ELISA試劑盒96T試劑盒 組裝/原裝

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠內(nèi)(ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

操作步驟(僅供參考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定，使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍，使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品：  
a,細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解，可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，低速離心取上清，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
b,血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，用生理鹽水10倍稀釋后， 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，尿液通常也可以直接用于測(cè)定，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
c,全血樣品：收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi)，顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次，用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min，棄上清，沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  
e,高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  
3、 CAT檢測(cè)：按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度，分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì)，亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè)，但如果有條件，盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零，讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。