注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。

產(chǎn)品名稱：人2,3-二磷酸甘油酸ELISA檢測試劑盒
英文名稱：2,3-Disphosphoglycerate

檢測范圍：100nmol/L~3200nmol/L

靈敏度：10

產(chǎn)品貨號：BJ-H63226
規(guī)格：48T/96T
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

組成：
48孔配制：
1.說明書: 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1個
4  酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  產(chǎn)品名稱說明書:1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1個
4.  酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  顯色劑A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫
度達到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
直接進入第 5 步封閉。 
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育
30 min； 
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37
℃濕盒中孵育 30 min； 
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。 

注意事項:
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)
(R)-9-[2-(二乙基磷?；籽趸?丙基]腺嘌呤 (R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl] Adenine 180587-75-1 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-yl)乙醇-d4 2-(6-Amino-9H-purin-9-yl)ethanol-d4 707-99-3 (unlabeled) 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

N-6-(δ2-異戊烯基)-腺嘌呤 N-6-(δ2-Isopentenyl)-adenine 2365-40-4 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤 9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine 3257-73-6 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽 EHNA hydrochloride 51350-19-7 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

2-氟腺嘌呤 2-Fluoroadenine 700-49-2 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸鈉鹽 Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate sodium salt 19254-05-8 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

煙酸腺嘌呤二核苷磷酸鈉鹽 Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate sodium salt 5502-96-5 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

煙酸腺嘌呤二核苷酸鈉鹽 Nicotinic acid adenine dinucleotide sodium salt 104809-30-5 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

α-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 α-Nicotinamide adenine dinucleotide 7298-93-3 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

NAD+, 鋰鹽 NAD+, Lithium Salt 64417-72-7 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

9-甲基-d3-腺嘌呤 9-Methyl-d3 Adenine 130859-46-0 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

β-煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸, 縮減環(huán)已基銨鹽 β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt 100929-71-3 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

β-煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸,縮減二鉀鹽 β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced dipotassium salt 104809-32-7 質(zhì)量規(guī)格：美國進口  

人2,3-二磷酸甘油酸ELISA檢測試劑盒人促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人促甲狀腺受體抗體(TSHR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人促黃體(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人促紅細胞**素抗原（EPO-Ag）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人促紅細胞**素抗體（EPO-Ab）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雌酮E（ESTRONE）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雌誘導(dǎo)蛋白PS2 ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雌受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雌(E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。