注：本公司提供試劑盒免費(fèi)代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品名稱：人脂肪炎癥因子ELISA檢測試劑盒
英文名稱：Apelin

檢測范圍：2.5ng/mL~80ng/mL

靈敏度：0.1

產(chǎn)品貨號：BJ-H63268
規(guī)格：48T/96T
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

組成：
48孔配制：
1.說明書: 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1個
4  酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  產(chǎn)品名稱說明書:1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1個
4.  酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  顯色劑A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫
度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
直接進(jìn)入第 5 步封閉。 
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育
30 min； 
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37
℃濕盒中孵育 30 min； 
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。 

注意事項:
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)
KLHL36/C16orf44  Kelch樣蛋白36抗體 規(guī)格: 0.2mlCASC5  瘤易感性候選基因5抗體 規(guī)格: 0.2ml

GABRA1  G1氨基丁酸A型受體α1抗體 規(guī)格: 0.1mlTIMP-2  金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-APE(Ser1417)  磷酸化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 規(guī)格: 0.1mlDC-SIGN/CD209  細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgM/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlPLGLB2  纖溶酶相關(guān)蛋白B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cdc7  細(xì)胞分裂周期蛋白7抗體 規(guī)格: 0.1mlAKT3  蛋白激酶B3 規(guī)格: 0.1ml

HSPBAP1  熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlGRM2/GLUR2  促代謝型谷氨酸受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

TTC23  宮頸原基因8抗體 規(guī)格: 0.2mlCytokeratin 13/CK-HMW  高分子量細(xì)胞角蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

RIT1  RIT1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTPSB2  肥大細(xì)胞類胰蛋白酶β2 規(guī)格: 0.1ml

p53BP1/53BP1  p53結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlSmad4  Smad4抗體 規(guī)格: 0.1ml

NFKBIB/IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-IKK gamma(Ser43)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

ADAM18  去整合素樣金屬蛋白酶18抗體 規(guī)格: 0.2mlTestis  瘤抑制基因Testin抗體 規(guī)格: 0.2ml

AQP3  水通道蛋白-3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Slc26a5  感覺神經(jīng)性耳聾常染色體隱性遺傳61抗體 規(guī)格: 0.2ml

HAUS4/C14orf94  14號染色體開放閱讀框94抗體 規(guī)格: 0.2ml

RXR beta/RXRB  核受體RXRβ抗體 規(guī)格: 0.1ml

MEF2A  肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

人脂肪炎癥因子ELISA檢測試劑盒犬一氧化氮合成酶（NOS）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬葉酸(FA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬血管性血友病因子（VWF）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬心肌特異性肌鈣蛋白T（CTnT）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬瘟熱病毒（CDV）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬維生素K1(VK1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

犬維生素E(VE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。