操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱:人催乳素ELISA檢測試劑盒
英文名稱:prolactin
檢測范圍:25mIU/L~800mIU/L
靈敏度:1
產(chǎn)品貨號:BJ-H63678
規(guī)格:48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
組成:
48孔配制:
1.說明書: 1份
2. 封板膜: 2片(48)
3. 密封袋: 1個
4 酶標包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標準品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標準品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置:
1. 產(chǎn)品名稱說明書:1份
2. 封板膜:2片(96)
3. 密封袋: 1個
4. 酶標包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 標準品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標準品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準
MCG10 RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 規(guī)格: 0.2mlRobo2 軸突導向受體蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Alpha 2 antiplasmin α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體 規(guī)格: 0.2mlccnb1ip1 周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlp70 S6 kinase alpha 磷酸化核糖體p70 S6蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml
C21ORF62 21號染色體開放閱讀框62抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-NFAT5 (Ser1197) 磷酸化活化T細胞核因子5蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC8 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHA8 原鈣粘附蛋白α8抗體 規(guī)格: 0.2ml
NDUFAF4 調(diào)節(jié)增值細胞相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRSRC2 食道抑制生蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
large S protein 人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlCDK5 周期素依賴性激酶5抗體 規(guī)格: 0.1ml
MLK2/MAP3K10 絲裂原活化蛋白激酶3K10抗體 規(guī)格: 0.2mlNucleolin/C23 核仁蛋白C23抗體 規(guī)格: 0.2ml
AMBRA1 自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 規(guī)格: 0.2mlAPS APS抗體 規(guī)格: 0.1ml
GRP 促胃泌素釋放肽抗體 規(guī)格: 0.2mlAPH1a 早老素γ分泌酶抗體 規(guī)格: 0.2ml
IQCG IQCG蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSOSSC/C9orf80 單鏈DNA結(jié)合蛋白相互作用蛋白1 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PRKCA(Ser657+Tyr658) 磷酸化蛋白激酶C抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PAK4(Ser99) 磷酸化p21激活激酶4抗體 規(guī)格: 0.1ml
PDZD7 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCIDE A DNA斷裂因子相似蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格: 0.1mlGlycerol kinase 甘油激酶抗體 規(guī)格: 0.2ml
ATG1/ULK1 自噬相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPRR11 富含脯氨酸蛋白11抗體 規(guī)格: 0.2ml
TSHR 促甲狀素受體抗體 規(guī)格: 0.1mlMAGEA10 黑色素瘤相關(guān)抗原10抗體 規(guī)格: 0.2ml
人催乳素ELISA檢測試劑盒組織蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
血液蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞磷酸腺苷脫氨酶(AMPD)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
組織磷酸腺苷脫氨酶(AMPD)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
組織β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
組織纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
真/酵母纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
植物纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞纖維素酶(cellulase)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
組織纖維素酶(cellulase)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細纖維素酶(cellulase)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
真/酵母纖維素酶(cellulase)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次