注：本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱：人4-羥基壬烯酸ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱：8-Hydroxy-desoxyguanosine antibody
檢測(cè)范圍：6.25ng/ml~200ng/ml
靈敏度：1
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-H68302
規(guī)格：48T/96T
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
組成：
48孔配制：
1.說明書: 1份
2. 封板膜: 2片（48）
3. 密封袋: 1個(gè)
4 酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1. 產(chǎn)品名稱說明書:1份
2. 封板膜:2片（96）
3. 密封袋: 1個(gè)
4. 酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫
度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育
30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37
℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
注意事項(xiàng):
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)
鎢硅酸(>98%,BR) Silicotungstic acid hydrate 12027-43-9 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 組織半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
乙酸銀(>99%,BR) Silver acetate 563-63-3 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 血液半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
氯化銀(>99%,BC) Silver chloride 7783-90-6 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC 體液半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
偏釩酸銀(>98%,BR) Silver metavanadate 13497-94-4 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 植物半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
銀粉（200目）(>99.5%,EP) Silver powder 7440-22-4 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,EP 通用型半胱氨酸（cysteine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉(>98%,BR) Sodium 5-nitroguaiacolate 67233-85-6 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 細(xì)胞半胱氨酸（cysteine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
苯亞磺酸鈉(>98%,BR) Sodium benzenesulfinate 873-55-2 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 組織半胱氨酸（cysteine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
鉍酸鈉(>80%,BC) Sodium bismuthate 12232-99-4 質(zhì)量規(guī)格：>80%,BC 血液半胱氨酸（cysteine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
泛影酸鈉(>98%,BC) Sodium diatrizoate dihydrate 737-31-5 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 體液半胱氨酸（cysteine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
氟鋁酸鈉(>98%,BR) Sodium fluoroaluminate 15096-52-3 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 植物半胱氨酸（cysteine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
馬尿酸鈉(>98%,BR) Sodium hippurate 532-94-5 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 通用型胱氨酸（cystine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
月桂酸鈉(>95%,BR) Sodium laurate 629-25-4 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 細(xì)胞胱氨酸（cystine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
偏鋁酸鈉(分子生物學(xué)級(jí)) Sodium metaaluminate 11138-49-1 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí) 組織胱氨酸（cystine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
偏釩酸鈉二水(>98%,BC) Sodium metavanadate dehydrate 13718-26-8 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 血液胱氨酸（cystine）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
人4-羥基壬烯酸ELISA檢測(cè)試劑盒小鼠 EPHB3 基因全長ORF克隆EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 EFNB1 基因全長ORF克隆E.coli/EPEC 大腸埃希體蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 EFNA2 基因全長ORF克隆E.coli O139 抗志賀大腸桿O139抗體（仔豬水腫病志賀大腸桿O139）規(guī)格: 0.2ml
小鼠 TFF2 基因全長ORF克隆E. coli LPS 大腸桿脂多糖抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 CHST3 基因全長ORF克隆EP3 前列腺素E受體3抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 YWHAS / SFN 基因全長ORF克隆Endomucin 內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 EPHA4 基因全長ORF克隆EphA1/Ephrina1/Ephrin A1 Receptor 內(nèi)皮 受體蛋白酪氨酸激酶A抗體（腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4）規(guī)格: 0.1ml
小鼠 CDK5 基因全長ORF克隆EphA4 酪氨酸蛋白激酶A4抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 FOLR1 基因全長ORF克隆Ephrin B Ephrin B抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 FETUB 基因全長ORF克隆phospho-Ephrin B(Tyr329) 磷酸化Ephrin B抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 CNTN4 基因全長ORF克隆phospho-Ephrin B(Tyr316) 磷酸化Ephrin B抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 ARMETL1 基因全長ORF克隆phospho-Ephrin B(Ser300) 磷酸化Ephrin B抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 FZD10 基因全長ORF克隆phospho-Ephrin B(Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B抗體規(guī)格: 0.1ml
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。