注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱:人脯氨酸肽酶ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Plasma protease C1 inhibitor
檢測范圍:37.5ng/mL~1200ng/mL
靈敏度:1
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-H68332
規(guī)格:48T/96T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
組成:
48孔配制:
1.說明書: 1份
2. 封板膜: 2片(48)
3. 密封袋: 1個(gè)
4 酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置:
1. 產(chǎn)品名稱說明書:1份
2. 封板膜:2片(96)
3. 密封袋: 1個(gè)
4. 酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),
直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)
2,6-二溴萘(>98.0%(GC)) 2,6-Dibromonaphthalene 13720-06-4 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米MON802品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
1,3-二溴-7-叔丁基芘(>97.0%(GC)) 1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene 1005771-04-9 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因玉米Bt-Xtra品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
6,12-二溴屈(>98.0%(HPLC)) 6,12-Dibromochrysene 131222-99-6 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 玉米樣品處理試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC)) 9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene 13688-68-1 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因大豆GTS40.3.2品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC)) 2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione 84405-44-7 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 大豆樣品處理試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T)) Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride 81-30-1 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)GT73品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
1,4,5,8-萘四甲?;啺?>97.0%(N)) 1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide 5690-24-4 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(N) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
3,4,9,10-苝四甲酰二亞胺(>95.0%(N)) 3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide 81-33-4 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN28品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
硒吩(>98.0%(GC)) Selenophene 288-05-1 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)MS8品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,2',7,7'-四溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T)) 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene] 128055-74-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)RF3品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
1,3,6,8-四溴芘(>98.0%(T)) 1,3,6,8-Tetrabromopyrene 128-63-2 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)OXY235品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
2,2',7,7'-四溴-9,9-聯(lián)亞芴基(>98.0%(HPLC)) 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene 27192-91-2 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)T45品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
酞菁銅(II)(α-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (α-form) 147-14-8 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T) 油菜樣品處理試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (β-form) 147-14-8 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T) 轉(zhuǎn)基因棉花MON1445品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
人脯氨酸肽酶ELISA檢測試劑盒小鼠 SPINT1 基因全長ORF克隆phospho-Pyk2 (Tyr881) 磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 LGALS7 基因全長ORF克隆FAR2 脂肪酰輔酶A還原酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 CD5 基因全長ORF克隆phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 APP / PN2 基因全長ORF克隆FANCD2 FANCD2抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 Desmocollin-2 基因全長ORF克隆phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 MS4A1 基因全長ORF克隆FANCF 范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 ENTPD1 基因全長ORF克隆FAM3B/PANDER 胰腺衍生因子抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 ADAMTS15 基因全長ORF克隆IMPDH2 5'肌苷磷酸脫氫酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 GRN 基因全長ORF克隆FAS/Apo-1/CD95 載脂蛋白A1抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 CD9 基因全長ORF克隆ANP32C 致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
小鼠 FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆phospho-FAS (Tyr291) 磷酸化載脂蛋白A1抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 CD3G 基因全長ORF克隆phospho-FAS (Tyr232) 磷酸化載脂蛋白A1抗體規(guī)格: 0.1ml
小鼠 VEGF-C 基因全長ORF克隆APOA1 載脂蛋白A1抗體規(guī)格: 0.1ml
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。