ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下：
1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀(guān)察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀(guān)察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠胰島素降解酶ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：Insulin
檢測(cè)范圍：1.5ng/mL~48mU/L
靈敏度：0.1
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-R70141
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品保存：2-8℃，有效期6個(gè)月
主要組成成分：試劑
性狀：液體
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本，2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本，1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
96T-84個(gè)樣本
48T-42個(gè)樣本
待檢樣本：體液，血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液，尿液，組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
樣品收集、處理及保存方法
1）血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
組成結(jié)構(gòu)：
1、 血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)
試劑盒成分：
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)
2'-脫氧-β-L-腺苷 2'-Deoxy-β-L-adenosine 14365-45-8 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組織蛋白酶G（cathepsin G） 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：0.25單位
異鳥(niǎo)苷水合物 Isoguanosine Hydrate 359436-55-8 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 1摩爾DTT 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：1毫升
3,5-O-(1,1,3,3-四異丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷 3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine 69304-45-6 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 PCR級(jí)無(wú)離子純水 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
5-碘-5-脫氧環(huán)磷腺苷 5'-Iodo-5'-deoxy Adenosine 4099-81-4 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 10摩爾 Ammonium Acetate分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升
2-疊氮腺苷 2-Azido Adenosine 59587-07-4 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 0.5摩爾 EDTA分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
2',3'-亞異丙基腺苷 2',3'-Isopropylidene Adenosine 362-75-4 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 1摩爾 HEPES pH7.2分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升
2-碘代-5'-乙基酰胺基腺苷 2-Iodo-5'-ethylcarboxamido Adenosine 141018-29-3 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 10% SDS分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
瑞加德松 Regadenoson 313348-27-5 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 1摩爾 TRIS pH7.5分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
2-碘代腺苷 2-Iodo Adenosine 35109-88-7 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 1摩爾 TRIS pH8.0分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
N6-丙酰蟲(chóng)草素 N6-Propionyl Cordycepin 77378-04-2 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 LoTE分子生物級(jí)溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
N6-月桂酰蟲(chóng)草素 N6-Lauroyl Cordycepin 77378-06-4 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 5 倍 MOPS分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
鳥(niǎo)苷酰(2' 5')腺苷銨鹽 Guanylyl(2' 5')adenosine ammonium salt 103192-47-8 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 10倍 MOPS分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
5‘-O-乙酰腺苷 5'-O-Acetyl Adenosine 2140-25-2 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 20 倍 SSC分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
腺苷3',5'-環(huán)單磷酸鹽，N6-苯甲酰-鈉鹽 Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphate, N6-Benzoyl-, Sodium Salt 30275-80-0 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 10 倍 TBE分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：500毫升
大鼠胰島素降解酶ELISA檢測(cè)試劑盒甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)Hck 造血 激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)Factor H 補(bǔ)體因子H抗體規(guī)格: 0.1ml
甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)FHL2 相互作用蛋白FHL2抗體規(guī)格: 0.1ml
甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)HCN4 環(huán)化核苷酸調(diào)控陽(yáng)離子通道蛋白亞型4規(guī)格: 0.1ml
甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)HCLS1/LckBP1 造血干 特異性蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)HCV-Core protein 丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體規(guī)格: 0.1ml
甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體規(guī)格: 0.2ml
甲型流感 H1N1 (A/WSN/33) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)Heamachrome 血紅素抗體規(guī)格: 0.2ml