注：本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢(xún)銷(xiāo)售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品名稱(chēng)：白細(xì)胞介素21試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-100380
規(guī)格：48T/96T
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

組成：
48孔配制：
1.說(shuō)明書(shū): 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1個(gè)
4  酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  產(chǎn)品名稱(chēng)說(shuō)明書(shū):1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1個(gè)
4.  酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  顯色劑A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫
度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
直接進(jìn)入第 5 步封閉。 
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜； 
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育
30 min； 
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37
℃濕盒中孵育 30 min； 
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 
15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。 

注意事項(xiàng):
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．  如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)
聚丙烯酸鈉Poly(acrylic acid sodium salt2594415500G

硫酸氨基胍Aminoguanidine hemisulfate salt (≥98%)996-19-025G

氫氧化鋁Aluminum hydroxide21645-51-225G

D-精氨酸D-Arginine (≥98%,TLC)157-06-2500MG

香葉醇Geraniol (≥96.0%)106-24-125ML

萘基乙烯胺n-(1-Napthyl)Ethylene Diamine (≥98%)1465-25-410G

米托胍腙Mitoguazone(>99.9%,MGBG)459-86-91G

綠原酸Chlorogenic Acid (≥95%)327-97-9500MG

蛋黃卵磷脂L-α-Phosphatidylcholine,from egg yolk...8002-43-525G

柴胡皂苷ASaikosaponin A (≥98%,HPLC)20736-09-820MG

柴胡皂苷CSaikosaponin C (≥98%,HPLC)20736-08-720MG

柴胡皂苷DSaikosaponian D (≥98%,HPLC)20874-52-620MG

白細(xì)胞介素21試劑盒TSPAN14  四分子交聯(lián)體14抗體（四旋蛋白） 規(guī)格: 0.2ml

P-cadherin  P-鈣粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml

CA III/Carbonic anhydrase 3  碳酸酐酶3抗體 規(guī)格: 0.2ml

KIST/UHMK1  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶KIST抗體（激酶相互作用與白病相關(guān)基因） 規(guī)格: 0.2ml

CD160/By55  NK細(xì)胞受體BY55抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cell death inducing protein/C16orf5  細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

NCoR2  核受體輔助抑制因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Acetyl and phospho-Histone H3(Ac-K9/p-Ser10)  乙?；土姿峄M蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1ml

PDCD10  凋亡相關(guān)蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-SYT1(Ser309)  磷酸化突觸結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml

CXCR2/CD182  細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE  PE標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml

LIS1  無(wú)腦回的致病基因LIS1抗體 規(guī)格: 0.2ml

SPRR3/Cornifin B  角質(zhì)蛋白β抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。