ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
產(chǎn)品名稱:白細(xì)胞介素1試劑盒
產(chǎn)品貨號:BJ-100383
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品保存:2-8℃,有效期6個(gè)月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本,2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本,1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照
96T-84個(gè)樣本
48T-42個(gè)樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
組成結(jié)構(gòu):
1、 血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測
試劑盒成分:
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)
白樺脂酸Betulinic acid (≥98%,HPLC)472-15-120MG
升麻素苷Prim-O-glucosylcimifugin (≥98%,HPLC)80681-45-420MG
升麻素cimifugin (≥98%,HPLC)37921-38-320MG
類葉升麻苷Acteoside (≥98%,HPLC)61276-17-320MG
異類葉升麻苷Isoacteoside (≥98%,HPLC)61303-13-720MG
松果菊苷Echinacoside (≥98%,HPLC)82854-37-320MG
5-O-甲基維斯阿米醇苷4'-O-β-D-Glucosyl-5-O-methylvisammin...84272-85-520MG
枸櫞酸鈉.2水Sodium Citrate Tribasic Dihydrate ( ≥...1545801100G
二十二碳六烯酸cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic ac...6217-54-525MG
三丁基膦Tributylphosphine (97%)998-40-325ML
白陶土Kaolin1332-58-7500G
N-甲基-DL-天冬氨酸N-Methyl-DL-Aspartic Acid17833-53-31G原裝
白細(xì)胞介素1試劑盒IGF1R/CD221 胰島素樣生因子1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlNectin 2/CD112 細(xì)胞粘附分子CD112抗體 規(guī)格: 0.1ml
ANGPTL5 管**素相關(guān)蛋白5 規(guī)格: 0.2mlEgr1 早期生應(yīng)答蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TAG1/CNTN2 瞬時(shí)表達(dá)軸索糖蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlCXCR5/CD185 細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體 規(guī)格: 0.1ml
BGP/Osteocalcin 骨保護(hù)蛋白/骨鈣素抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Ninein/GSK3B interacting protein GSK3B相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlAxin 2 軸抑制蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
MCT1 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Histone H3 (Ser10) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlPAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受體-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
SUGT1 SUGT1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTBX3 轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 規(guī)格: 0.2ml
EGR3 早期生反應(yīng)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlDVL2 蓬亂蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
G protein beta 3/GNB3 G蛋白β3抗體/鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白β亞基3 規(guī)格: 0.2mlLOXL4 賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
BAFFR/CD268 B細(xì)胞活化因子受體抗體 規(guī)格: 0.2mlENPP3/CD203c ENPP3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
WNT12/WNT10B 信號通路WNT10B抗體 規(guī)格: 0.1mlCA II/Carbonic anhydrase 2 碳酸酐酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Urocortin 尿皮質(zhì)素抗體 規(guī)格: 0.2mlGABABR1 gamma氨基丁酸B型受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml
HDC L-組氨酸脫羧酶抗體 規(guī)格: 0.1mlNDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquinone) FeS protein 1 (75kD) 線粒體復(fù)合物NDUFS1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml