原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號
P-X1897
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
骨骼肌組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳1-3代
用途
僅供科研
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌成纖維細(xì)胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方。骨骼肌間質(zhì)中有很多成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔腸間質(zhì)細(xì)胞 Rabbit intestinal interstitial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；ES |
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小鼠主動脈弓內(nèi)皮細(xì)胞 Mouse primary aortic arch endothelial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；mAb D7 |
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D341Med(人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
人黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞亞系 |
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大鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞 |
人乳腺癌表柔比星耐藥細(xì)胞株 |
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ME-180 (人頸表皮癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔腸間質(zhì)細(xì)胞 Rabbit intestinal interstitial cells |
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人前列腺正常細(xì)胞；RWPE-2 |
人胚腎細(xì)胞-F克隆；293F |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理條件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進行鑒定和驗證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實驗需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因為過多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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軸突蛋白3 beta抗體 Neurexin-3-beta |
冰凍切片組織DAP KINASE蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
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骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 BMP4 |
同源相互作用蛋白激酶4抗體 |
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睪丸特異絲氨酸/蘇氨酸激酶6抗體 TSSK6 |
PCDHB1 |
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CD39重組兔單克隆抗體 CD39/ENTPD1 |
原鈣粘附蛋白β1抗體 |
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腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體 TRIP |
糞便副傷A（Salmonella Paratyphi A）定性基因檢測試劑盒 |
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磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激 Phospho-CRTC1 (Ser151) |
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa檢測試劑盒 |
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離子型谷氨酸受體4抗體 GLUR4 |
L型氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 LAT2 |
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γ干擾素誘導(dǎo)蛋白202抗體 IFI202 |
軟骨相關(guān)蛋白CRTAP抗體 CRTAP |
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BRD3蛋白抗體 BRD3 |
人瘤病毒18型E4抗體 HPV18 E4 |
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白介素17受體抗體 IL17RA |
MS4A4E蛋白抗體 MS4A4E |
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纖維母細(xì)胞生長因子4抗體 FGF4 |
鋅指蛋白754抗體 Anti-Rex1/Zinc finger protein 754 |
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鋅指蛋白BED5抗體 Anti-ZBED5 |
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；DMS153 |
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神經(jīng)毒性因子ICP34.5（人單純皰疹Ⅰ型）抗體 Anti-HSV 1 |
線粒體蘋果酸脫氫酶2抗體 MDH2 |
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冰凍切片結(jié)締組織（CONNECTIVE TISSUE）格莫瑞（Gomori）染色試劑盒 |
大鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)elisa分析檢測試劑盒 |
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昆蟲膜蛋白提取試劑盒50T |
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK6抗體 Anti-SLITRK6 |
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?；D(zhuǎn)移酶（AAT）測試盒 |
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa檢測試劑盒免費代測 |
原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項?：
一、在進行原代細(xì)胞培養(yǎng)時，需要注意以下幾點：
二、?無菌操作?：整個過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時進行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對于需要長期保存的細(xì)胞，可以進行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。