本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
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產(chǎn)品貨號 |
P-X1780 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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組織來源 |
冠狀動脈 |
生長特性 |
貼壁 |
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細(xì)胞形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品類別 |
小鼠原代細(xì)胞 |
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傳代特性 |
可傳3代左右 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞簡介：
小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細(xì)胞成分，細(xì)胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化，調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細(xì)胞，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 Primary rabbit dorsal root ganglion cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；MA-4G8 |
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小鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 Mouse primary aortic smooth muscle cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；3A6 |
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NCI-H1568 [H1568]（人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞） (STR鑒定正確) |
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
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大鼠胸腺上皮細(xì)胞 |
原代細(xì)胞 |
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MDA-MB-468-06 (人乳腺癌細(xì)胞) |
兔背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 Primary rabbit dorsal root ganglion cells |
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人前列腺癌細(xì)胞；LNCaP2 |
雜交瘤細(xì)胞株；1H7F8 |
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。
5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何問題可聯(lián)系我們在線客服。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 |
HDL-C ELISA kit |
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人β抑制蛋白2(ARRB2)elisa分析檢測試劑盒 |
磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶2抗體 phospho-MSK2 (Thr568) |
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phospho-MYBL2 (Thr487) |
FBXO46蛋白抗體 FBXO46 |
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胞質(zhì)5'核苷酸酶1A抗體 Anti-NT5C1A |
FAM167B蛋白抗體 FAM167B |
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Rabbit Anti-Chicken IgG H&L / APC |
MIFELISAKit |
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APC標(biāo)記的兔抗雞IgG H&L |
豚鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)elisa分析檢測試劑盒 |
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重組豬細(xì)小VP2蛋白抗體 Anti-VP2 |
humanARRB2ELISAKit |
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C1QTNF8 |
大鼠高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)elisa分析檢測試劑盒 |
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細(xì)胞生長抑制蛋白34 Anti-RPL11/GIG34 |
GnIHELISAkit |
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肺癌抑癌蛋白1抗體 Anti-TUSC1 |
豬促性腺抑制(GnIH)elisa分析檢測試劑盒 |
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MPHOSPH10 |
環(huán)境鎂離子濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 |
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M期磷蛋白10抗體 |
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-GFP |
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山羊白介素6(IL-6)elisa檢測試劑盒 |
補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體 |
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魚生長(GH)elisa分析檢測試劑盒 |
猴白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒 |
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CAELISAKit |
大鼠抗繆勒管(AMH)elisa檢測試劑盒 |
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IL-6 ELISA Kit |
小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞人兒茶酚胺(CA)elisa分析檢測試劑盒 |