原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號(hào)
P-X1860
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來(lái)源
頜下腺組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳1-2代
用途
僅供科研
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞分離自頜下腺組織；頜下腺是下頜部的唾液腺，左右各一個(gè)。頜下腺屬于唾液腺的一種，主要的功能就是分泌唾液。機(jī)體共有三大唾液腺，包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方，接近下頜骨彎曲角附近，所以也叫下頜下腺（下頜骨下方的唾液腺），左右各一，由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管，主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細(xì)胞是一種高度分化的上皮細(xì)胞，在體外難以長(zhǎng)期存活和保持分化狀態(tài)；頜下腺的主要病理變化有：①頜下腺炎；②頜下腺囊腫；③頜下腺腫；④頜下腺結(jié)石。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠頜下腺上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠頜下腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔DRG神經(jīng)元細(xì)胞 Rabbit DRG neuron cell |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；8B7 |
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小鼠椎體終板軟骨干細(xì)胞 Primary mouse vertebral endplate chondrostem cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；XYCSJL-AIV-4B7 |
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NCI-H146 [H146]（人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞） (STR鑒定正確) |
人骨巨細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
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小鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞 |
大鼠軟骨細(xì)胞 |
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MDA-MB-453 (人乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔DRG神經(jīng)元細(xì)胞 Rabbit DRG neuron cell |
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人前列腺癌細(xì)胞；LNCaP |
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H838 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人骨涎蛋白(BSP)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
LSM14A/C19orf13 |
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全組織溶酶體脂酶（酸性脂酶）活性染色試劑盒 |
人二酰基甘油(DAG/DG)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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BSPELISAKit |
BMPR2 ELISA kit |
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環(huán)指蛋白133抗體 Anti-RNF133 |
猴骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體2型(BMPR2)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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Rat Substance P ELISA Kit |
CYP2W1 |
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大鼠P物質(zhì)(SP)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
細(xì)胞色素P450 2W1抗體 |
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L選擇素抗體 Anti-L-Selectin/CD62L |
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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OR5T3 |
LSM14A蛋白抗體 |
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N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體 Anti-NAT8B |
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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鋅指蛋白340抗體 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4 |
大鼠C-型鈉尿肽(CNP)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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phospho-ICK (Tyr159) |
磷酸化酶β抗體 Anti-PHKB |
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絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體 |
人乳腺癌細(xì)胞（紅色熒光蛋白標(biāo)記）；MDA-MB-231-Red3 |
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溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體 Anti-Slc22a5 |
嗅覺(jué)受體5T3抗體 |
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金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體（N端） Anti-TIMP-1(NT) |
ORC5L蛋白抗體 |
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HDHD1A |
血小板源性生長(zhǎng)因子受體A抗體(PDGFRα) Anti-PDGFRA |
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ORC5L |
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內(nèi)含蛋白1A抗體 |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。