原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
組織來源
滑膜
貨號(hào)
P-X1895
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長特性
貼壁
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
小鼠滑膜成纖維細(xì)胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變。滑膜細(xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細(xì)胞)、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成?；ぜ?xì)胞主要功能：①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān)；②滑膜細(xì)胞，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠滑膜成纖維細(xì)胞采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠滑膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔DC細(xì)胞 Rabbit DC cell |
一種產(chǎn)生抗羅非魚無乳鏈球菌的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；4C12 |
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小鼠椎體終板軟骨細(xì)胞 Mouse primary vertebral endplate chondrocytes |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；6B3-C5-SP20 |
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HMY-1（人黑色素瘤細(xì)胞）(STR鑒定正確) |
人宮頸永生化鱗狀細(xì)胞 |
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大鼠胸腺細(xì)胞 |
大鼠心肌成纖維細(xì)胞 |
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MDA-MB-436 (人乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔DC細(xì)胞 Rabbit DC cell |
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人前列腺癌細(xì)胞；DU 145 [DU145；DU-145] |
人腎腺癌細(xì)胞；ACHN |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
MAGEH1 |
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大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
9號(hào)染色體開放閱讀框103抗體 |
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HDL-CELISAKit |
NMRAL1 |
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多功能DNA修復(fù)酶抗體 Anti-REF1/APEX1 |
NMRAL1蛋白抗體 |
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Rat PGS1 ELISA kit |
C16orf61 |
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大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷酸3磷脂酰轉(zhuǎn)移酶,線粒體(PGS1)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
16號(hào)染色體開放閱讀框61抗體 |
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突觸蛋白6抗體 Anti-SynaptotagminVI |
小鼠花生四烯酸(AA)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè) |
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EDEM1 |
黑色素瘤相關(guān)抗原H1抗體 |
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核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體 Anti-Nucleoprotein TPR |
石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O間接染色試劑盒 |
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鋅指蛋白913抗體 Anti-zbtb11/ZNF913 |
天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy7 |
磷酸化血小板源性生長因子受體α Anti-Phospho-PDGFRA(Tyr762) |
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PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG H&L |
人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508 |
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溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體 Anti-SLCO1C1/OATP-F |
EDEM1蛋白抗體 |
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磷酸化NF-κB活化激酶抗體 Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) |
原鈣粘附蛋白11Y/11X抗體 |
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CAP2 |
p21激活激酶2抗體 Anti-PAK2 |
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PCDH11Y + PCDH11X |
小鼠滑膜成纖維細(xì)胞環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體 |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無菌操作?：整個(gè)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。