原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
組織來(lái)源
骨髓
貨號(hào)
P-X1900
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長(zhǎng)特性
貼壁
產(chǎn)品類(lèi)別
小鼠原代細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
多核巨細(xì)胞
小鼠破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓；破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對(duì)平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，屬于不增殖細(xì)胞群，不能增殖和傳代，只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時(shí)間較短。
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠破骨細(xì)胞采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠破骨細(xì)胞經(jīng)TRAP染色檢測(cè)，純度可達(dá)30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 多核巨細(xì)胞
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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人脂肪細(xì)胞 Human primary adipocytes |
雜交瘤細(xì)胞株；SC20150701A |
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兔DC細(xì)胞 Rabbit DC cell |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T3-L1 |
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人肝星狀細(xì)胞 |
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大鼠視星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
抗人磷脂酰肌醇蛋白聚糖前體蛋白單抗7 |
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MCF-7/Taxol (人乳腺癌紫杉醇耐藥性細(xì)胞) |
人脂肪細(xì)胞 Human primary adipocytes |
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人胚胎心肌組織來(lái)源細(xì)胞；CCC-HEH-2 |
人胚胎，皮膚，肌肉；M-20 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類(lèi)型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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Epoxide hydrolase 1 |
大鼠P21蛋白(P21)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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DYNLT1 |
細(xì)胞質(zhì)FMR1相關(guān)蛋白抗體 |
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動(dòng)力蛋白輕鏈 |
LPHN3 |
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血小板源性生長(zhǎng)因子A抗體 Anti-PDGF-A |
蛛受體3抗體 |
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環(huán)氧化物水解酶1抗體 |
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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SUGT1蛋白抗體 Anti-SUGT1 |
P21 ELISA Kit |
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磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 Anti-phospho-PDHA1(Ser293) |
鋅指蛋白ZBTB6抗體 Anti-ZBTB6/ZNF482 |
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鈣結(jié)合蛋白39抗體 |
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體 Anti-STSL/ABCG8 |
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Toll樣受體2抗體 Anti-TLR2/CD282 |
環(huán)指蛋白130抗體 Anti-RNF130 |
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CAB39 |
鈉鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Anti-NKCC1 |
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血清類(lèi)粘蛋白1樣蛋白1+2+3抗體 |
植物質(zhì)膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T |
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大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pCMV5-AM） |
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-RFP |
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人高鐵血紅蛋白(MHB)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
ORMDL1 + ORMDL2 + ORMDL3 |
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BTF3 |
小鼠腎上腺素能受體β1(ADRβ1)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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轉(zhuǎn)錄因子BTF3抗體 |
大鼠果糖胺(FRA)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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LSM5蛋白抗體 |
小鼠破骨細(xì)胞LSM5 |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。