原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個細胞。
?2.細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。
產品貨號
P-X1843
產品規(guī)格
5×105
組織來源
前列腺
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
產品類別
小鼠原代細胞
傳代特性
可傳3代左右
用途
僅供科研
小鼠前列腺成纖維細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為腺，前列腺分泌的稱為“前列腺素”。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的前列腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠前列腺成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：公司實驗室分離的小鼠前列腺成纖維細胞經Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關產品：
|
人支氣管平滑肌細胞 Primary human bronchial smooth muscle cells；HBSMC |
雜交瘤細胞株；FLUA-1A5 |
|
兔鼻腔粘膜上皮細胞 Primary nasal mucosal epithelial cells of rabbits |
小鼠雜交瘤細胞；2H7 |
|
Ana-1 (小鼠巨噬細胞) (種屬鑒定正確) |
人肝卵圓細胞 |
|
人宮頸癌組織源細胞 |
抗人Nigo單抗7 |
|
MCF 7B (人乳腺癌細胞) |
人支氣管平滑肌細胞 Primary human bronchial smooth muscle cells；HBSMC |
|
人胚胎肺成纖維細胞；WI-38 |
轉化細胞 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細胞進行的培養(yǎng)。這些細胞通常來自活檢樣本或手術摘除的組織。原代培養(yǎng)的細胞尚未經過任何實驗室的人工選擇或適應。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經過初次分離培養(yǎng)后的細胞，在體外環(huán)境中經過多次分裂和增殖后的細胞。這些細胞已經適應了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細胞，以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經適應體外培養(yǎng)條件的細胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細胞達到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細胞特性
原代培養(yǎng)：原代細胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學特性，包括基因表達、酶活性、信號傳導等。這些特性使得原代細胞成為研究生理和病理條件下細胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學特性的改變。這些改變可能包括基因表達的變化、細胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細胞可能需要進行鑒定和驗證，以確保其仍具有所需的生物學特性。
4.培養(yǎng)結果
原代培養(yǎng)：所獲得的細胞在形態(tài)結構和功能活動上與體內原組織相似性大，更接近于生物體內的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細胞已適應體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細胞以滿足實驗需求，如構建組織工程產品、篩選和毒性測試等。5. 應用領域
原代培養(yǎng)：原代細胞通常用于篩選、毒理學測試、模型研究等領域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認為是更接近體內條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細胞被廣泛用于各種生物學研究，包括基因表達調控、信號轉導、細胞周期調控等。傳代細胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細胞生物學機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng)：需要嚴格控制無菌條件，避免細胞污染；注意細胞的存活率和純度，避免其他類型細胞的混雜；以及考慮細胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關注細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因為過多的傳代可能導致細胞老化或轉化。
公司正在出售的產品：
|
MT-ND3 |
膠體金標記的兔抗水IgG H&L |
|
FAM126B |
6號染色體開放閱讀框173抗體 |
|
FAM126B蛋白抗體 |
NDUFA7 |
|
人晚期氧化蛋白產物（AOPP）elisa檢測試劑盒 |
NADH氧化還原酶輔酶7抗體 |
|
NADH脫氫酶3抗體 |
紅細胞膜相關蛋白ERMAP抗體 |
|
豬食欲素/阿立新B(OX-B)elisa檢測試劑盒 |
Rabbit Anti-Mink IgG H&L / Gold |
|
大鼠金屬轉運蛋白1(MTP1)elisa檢測試劑盒 |
辣椒素受體樣蛋白1抗體 Anti-TRPV2/VRL1 |
|
人低分子質量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)elisa分析檢測試劑盒 |
乙酰輔酶A轉運蛋白1抗體 Anti-SLC33A1 |
|
DH5α電轉感受態(tài) |
神經元素3抗體 Anti-NGN3/Neurogenin 3 |
|
HumanLMP7/PSMB9檢測試劑盒 |
核糖核酸酶6抗體 Anti-Ribonuclease 6 |
|
驢孕/孕酮(PROG)elisa分析檢測試劑盒 |
藻類膜蛋白提取試劑盒50T |
|
小量腺病毒溶斑純化試劑盒 |
人乳腺癌細胞；HCC1937 |
|
人鈣離子通道抗體(IgG)elisa檢測試劑盒 |
PROG ELISA kit |
|
GoatBMP-2檢測試劑盒 |
PigNa+/K+-ATPase檢測試劑盒 |
|
山羊骨形成蛋白2(BMP-2)elisa分析檢測試劑盒 |
大鼠骨鈣素(OT)elisa檢測試劑盒 |
|
大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠前列腺成纖維細胞E3/UBPL ELISA Kit |
?原代細胞培養(yǎng)的注意事項?：
一、在進行原代細胞培養(yǎng)時，需要注意以下幾點：
二、?無菌操作?：整個過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
?三、細胞融合和傳代?：跟蹤細胞的融合狀態(tài)，適時進行傳代，避免細胞分化。
?四、冷凍保存和復蘇?：對于需要長期保存的細胞，可以進行冷凍保存，并注意復蘇時的操作細節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。