原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
組織來源
脂肪組織
貨號
P-X1904
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長特性
貼壁
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
小鼠前脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對外界機械損傷的抵抗力較強，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠前脂肪細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠前脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Primary human dermal microvascular endothelial cells |
小鼠小腸平滑肌細(xì)胞；MUS-M1 |
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兔表皮干細(xì)胞 Rabbit epidermal stem cells |
抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1 |
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AtT-20 (小鼠垂體瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
人肝腹水腺癌細(xì)胞 |
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小鼠嗅上皮細(xì)胞 |
抗人ORM1-like2單抗7 |
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MCF 10A (人正常乳腺上皮細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Primary human dermal microvascular endothelial cells |
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人胚腎細(xì)胞；2V6.11 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphB2 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理條件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進行鑒定和驗證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實驗需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因為過多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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OSBPL10 |
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG H&L |
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CAB39L |
軟骨蛋白樣蛋白抗體 |
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鈣結(jié)合蛋白樣39抗體 |
KIAA1191 |
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小鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1)elisa檢測試劑盒 |
KIAA1191蛋白抗體 |
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氧固醇結(jié)合蛋白樣10抗體 |
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4抗體 |
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線粒體超氧化物歧化酶（Mn/Fe SOD）分離試劑盒 |
Mouse Anti-Rat IgG H&L / AP |
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酵母核蛋白提取試劑盒50T |
血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體 Anti-Thrombomodulin/CD141 |
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人白介素22(IL-22)elisa分析檢測試劑盒 |
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2抗體 Anti-SNF1LK2/SIK2 |
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組蛋白H3-K9（mono/di/tri）甲基化檢測試劑盒 |
蛋白激酶C亞型G抗體 Anti-PKC-γ/SCA14 |
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IL-22檢測試劑盒 |
孕誘導(dǎo)阻斷因子抗體 Anti-PIBF |
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食蟹猴C肽(C-Peptide)elisa分析檢測試劑盒 |
絲狀蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T |
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小量腺病毒沉淀法純化試劑盒 |
人胃癌細(xì)胞；MKN-28 |
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人鈣結(jié)合蛋白S100A14 elisa檢測試劑盒 |
Cynomologus Monkey C-Peptide ELISA Kit |
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POSTN檢測試劑盒 |
pJAK3檢測試劑盒 |
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人骨膜蛋白/成骨細(xì)胞特異性因子2(POSTN)elisa分析檢測試劑盒 |
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)elisa檢測試劑盒 |
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大鼠P0蛋白(p0)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠前脂肪細(xì)胞p0 ELISA Kit |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項?：
一、在進行原代細(xì)胞培養(yǎng)時，需要注意以下幾點：
二、?無菌操作?：整個過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時進行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對于需要長期保存的細(xì)胞，可以進行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。