原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?:
1.?組織處理?:將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?:使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?:將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng),以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號(hào)
P-X1861
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
腎組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
梭形、多角形
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳1-2代左右
用途
僅供科研
小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞分離自腎上腺組織;腎上腺是人體相當(dāng)重要的器官,由于位于兩側(cè)腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察,腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,周圍部分是皮質(zhì),內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,分泌腎上腺素和去甲腎上腺素。這些在應(yīng)激狀態(tài)釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動(dòng)員全身的儲(chǔ)備物質(zhì),為機(jī)體與外界環(huán)境的抗?fàn)幾骱贸浞譁?zhǔn)備。腎上腺外部是皮質(zhì)部分,分泌醛固酮、皮質(zhì)醇和少量的雌雄。醛固酮能夠促進(jìn)小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數(shù)量的醛固酮,對(duì)維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌,會(huì)導(dǎo)致高血壓和低血鉀。皮質(zhì)醇是人體必需的之一。當(dāng)人體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí),比如感冒,發(fā)燒,遇到突發(fā)事件的時(shí)候,腎上腺皮質(zhì)分泌大量的皮質(zhì)醇,這些皮質(zhì)醇能夠動(dòng)員機(jī)體的存儲(chǔ)能源,為應(yīng)對(duì)內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。當(dāng)皮質(zhì)醇缺乏時(shí),機(jī)體在遇到重大事件的時(shí)候,往往缺乏足夠應(yīng)對(duì)能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chǎn)生的雄,對(duì)男性來講,并非必不可少,但是對(duì)女性而言,是雄的一個(gè)重要來源。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞經(jīng)3β-HSD熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
相關(guān)產(chǎn)品:
人硬腦膜成纖維細(xì)胞 Human primary dura fibroblasts |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIID12 |
兔腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 Rabbit primary intestinal neuroglial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;D11E8A1G5 |
C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
人肺小氣道上皮細(xì)胞 |
小鼠外周血中性粒細(xì)胞 |
抗人TATA框結(jié)合蛋白交互作用蛋白單抗7 |
MC/CAR (人外周血細(xì)胞) |
人硬腦膜成纖維細(xì)胞 Human primary dura fibroblasts |
人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9401 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別:
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞,在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件,并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來,然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性,包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng),可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此,傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證,以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng):所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng):由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快,傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求,如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性,因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究,包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng):需要嚴(yán)格控制無菌條件,避免細(xì)胞污染;注意細(xì)胞的存活率和純度,避免其他類型細(xì)胞的混雜;以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng):需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化,定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異;注意傳代次數(shù),因?yàn)檫^多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白Zdhhc12抗體 ZDHHC-12 |
組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
促性腺釋放受體抗體 GnRHR |
人促甲狀腺素釋放(TRH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
腸和大腦特定源蛋白2抗體 Gbx2 |
CaM ELISA Kit |
組織蛋白酶D輕鏈單克隆抗體 Cathepsin D |
植物鈣調(diào)素(CaM)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
鋅指蛋白673抗體 ZNF673 |
大鼠白蛋白(ALB)elisa檢測(cè)試劑盒 |
琥珀酸裂解酶抗體 Argininosuccinate Lyase |
人Toll樣受體3(TLR3)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
核纖層蛋白B(核內(nèi)參)單克隆抗體 Lamin B (Nuclear Loading Control) |
E3泛素蛋白連接酶MIB1抗體 Mib1 |
p53誘導(dǎo)蛋白3抗體 PIG3 |
磷酸相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 PID1 |
自噬相關(guān)蛋白16A抗體 ATG16L |
磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 phospho-VAV1 (Tyr174) |
PE-Cy7標(biāo)記人CD235a (GYPA)單克隆抗體 human CD235a (GYPA)/PE-Cy7 |
Ero1-Lβ蛋白抗體 ERO1LB |
生長(zhǎng)抑素受體1抗體 Somatostatin Receptor 1 |
魚巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
/酵母細(xì)胞線粒體分離(高純)試劑盒 |
人內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞;hEM15A |
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
雙特異性磷酸酶抗體13抗體 DUSP13 |
大量腺病毒沉淀法純化試劑盒 |
蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒 |
人鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶2C型成員1(ATP2C1)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè) |
大鼠活化凝血因子X(FXa)elisa檢測(cè)試劑盒 |
小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞絲狀蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?:
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
二、?無菌操作?:整個(gè)過程需要在無菌條件下進(jìn)行,以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?:跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài),適時(shí)進(jìn)行傳代,避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?:對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞,可以進(jìn)行冷凍保存,并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?:根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基,并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。