原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號(hào)
P-X1837
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來(lái)源
尿道組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品類(lèi)別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳1-2代
用途
僅供科研
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對(duì)細(xì)長(zhǎng)的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu)，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個(gè)狹窄部：一個(gè)在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個(gè)在越過(guò)小骨盆入口處；后一個(gè)在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、血塊及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu)，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱(chēng)為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動(dòng)脈處；盆段，自髂動(dòng)脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開(kāi)口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細(xì)胞；固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結(jié)締組織，營(yíng)養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。其中，輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠輸尿管上皮細(xì)胞采用先中性蛋白酶消化、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠輸尿管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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人胰島細(xì)胞 Primary human pancreatic islet cells |
大鼠垂體瘤細(xì)胞；GH3 |
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兔大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 Rabbit primary great saphenous vein endothelial cells |
倉(cāng)鼠源細(xì)胞 |
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F9 (小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
人肺鱗癌細(xì)胞 |
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小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 |
M18#13 |
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MA-104 [MA 104; MA104] (非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞) |
人胰島細(xì)胞 Primary human pancreatic islet cells |
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人胚肺二倍體細(xì)胞；2BS |
人胚腎上皮細(xì)胞系；KiMA |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類(lèi)型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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鋅指蛋白598抗體 ZNF598 |
大鼠胰脂肪酶(PL)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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叉頭蛋白O1/O3/O4抗體 FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 |
人鞭毛蛋白(flagellin)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
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表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗體 EGFRvIII |
Fish 17-hydroxypregnenolone ELISA kit |
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滋養(yǎng)層細(xì)胞特異性蛋白α抗體 Trophoblast specific protein alpha |
魚(yú)17-羥孕烯醇酮elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
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鋅指蛋白218抗體 ZNF218 |
兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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核糖體蛋白L15抗體 RPL15 |
全組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法 |
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含纈酪肽蛋白抗體 VCP |
DMRTC1蛋白抗體 DMRTC1 |
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NIPA1蛋白抗體 NIPA1 |
磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 phospho-Cdc6 (Ser54) |
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轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體 E2F4 |
磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 Phospho-NEDD4-2 (Ser342) |
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p21活化蛋白激酶ARHG7抗體 ARHG7 |
DYDC1蛋白抗體 DYDC1 |
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神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白3抗體 Neurexophilin 3 |
總氨基酸T-AA測(cè)試盒 80管/78樣 比色法 |
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細(xì)胞HHV6-A（HUMAN HERPESVIRUS 6-A）病毒 |
人舌鱗癌細(xì)胞；SCC15 |
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人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
生物鐘KAT13D蛋白抗體 |
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綿羊白介素12(IL-12)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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冰凍切片組織EGFR 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 |
大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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小鼠白介素22受體α2(IL2Rα2)elisa檢測(cè)試劑盒 |
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞Propidium Iodide染色試劑盒100T |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。