原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個細胞。
?2.細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號
P-X1834
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
腎組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
梭形、多角形
產(chǎn)品類別
小鼠原代細胞
傳代特性
可傳1-2代
用途
僅供科研
小鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾**原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球袢之間的一種特殊間充質(zhì)，由系膜細胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細胞是腎小球內(nèi)非?；钴S的細胞，具有分泌細胞基質(zhì)、產(chǎn)生細胞因子、吞噬和大分子物質(zhì)及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調(diào)節(jié)，以影響袢的內(nèi)壓和濾過率；②支持作用，它填充于袢之間，支持的位置；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì)；④分泌腎素，在腎缺血或復合物沉積時，系膜細胞且分泌腎素。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞采用機械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關產(chǎn)品：
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人胰腺成纖維細胞 Primary human pancreatic fibroblasts |
抗人磷脂酰肌醇蛋白聚糖前體蛋白單抗雜交瘤細胞；3A11C7H4D5 |
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兔腸粘膜上皮細胞 Rabbit intestinal mucosal epithelial cells |
大鼠骨髓瘤細胞；IR983F |
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CT26.WT (小鼠結(jié)腸癌細胞) (種屬鑒定正確) |
人肺腺癌放化療后復發(fā)轉(zhuǎn)移細胞 |
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小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞) |
抗人肝癌單抗F117 |
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MADB106 (大鼠乳腺癌細胞) (種屬鑒定正確) |
人胰腺成纖維細胞 Primary human pancreatic fibroblasts |
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人胚肝二倍體細胞；CCC-HEL-1 |
人胚肺細胞VA13細胞；WI-38 VA13亞系2RA |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細胞進行的培養(yǎng)。這些細胞通常來自活檢樣本或手術摘除的組織。原代培養(yǎng)的細胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細胞。這些細胞已經(jīng)適應了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細胞，以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應體外培養(yǎng)條件的細胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細胞達到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細胞特性
原代培養(yǎng)：原代細胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學特性，包括基因表達、酶活性、信號傳導等。這些特性使得原代細胞成為研究生理和病理條件下細胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學特性的改變。這些改變可能包括基因表達的變化、細胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細胞可能需要進行鑒定和驗證，以確保其仍具有所需的生物學特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細胞在形態(tài)結(jié)構和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細胞已適應體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細胞以滿足實驗需求，如構建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應用領域
原代培養(yǎng)：原代細胞通常用于篩選、毒理學測試、模型研究等領域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細胞被廣泛用于各種生物學研究，包括基因表達調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導、細胞周期調(diào)控等。傳代細胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細胞生物學機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng)：需要嚴格控制無菌條件，避免細胞污染；注意細胞的存活率和純度，避免其他類型細胞的混雜；以及考慮細胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關注細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因為過多的傳代可能導致細胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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PYCR1 |
堿性磷酸酶（AP）標記的羊抗小鼠IgM |
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INTS4L1 |
ADP核糖基化因子3抗體 |
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INTS4L1蛋白抗體 |
KAP21.3 |
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小鼠12-羥基二十烷四烯酸(12-HETE)elisa檢測試劑盒 |
角蛋白相關蛋白21.3抗體 |
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P5C還原酶1抗體 |
FUT5抗體 |
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細胞氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法 |
Goat Anti-Mouse IgM / AP |
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大鼠突觸體素/突觸素(Syp/SYN)elisa檢測試劑盒 |
泛素蛋白連接酶D1抗體 Anti-UBE2D1 |
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7號染色體開放閱讀框62抗體 |
線粒體二羧酸載體蛋白11抗體 Anti-SLC25A11 |
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菊花生根（rhizogenesis）培養(yǎng)基 |
胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 Anti-PRC1 |
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C7orf62 |
原鈣粘蛋白γA9抗體 Anti-PCDHGA9 |
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囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 |
魚金屬硫蛋白(MT)elisa分析檢測試劑盒 |
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小量酵母細胞轉(zhuǎn)化試劑盒 |
人喉癌結(jié)轉(zhuǎn)移細胞；LLN |
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人防御素 elisa檢測試劑盒 |
Involucrin |
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HDVIgG檢測試劑盒 |
OPG檢測試劑盒 |
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人丁型肝炎IgG(HDV IgG)elisa分析檢測試劑盒 |
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa檢測試劑盒免費代測 |
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倉鼠低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠腎小球系膜細胞VLDL ELISA Kit |
?原代細胞培養(yǎng)的注意事項?：
一、在進行原代細胞培養(yǎng)時，需要注意以下幾點：
二、?無菌操作?：整個過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
?三、細胞融合和傳代?：跟蹤細胞的融合狀態(tài)，適時進行傳代，避免細胞分化。
?四、冷凍保存和復蘇?：對于需要長期保存的細胞，可以進行冷凍保存，并注意復蘇時的操作細節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。