原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號(hào)
P-X2001
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來(lái)源
臍帶組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳2-3代
用途
僅供科研
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu)。原來(lái)是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長(zhǎng)部而形成的。臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。當(dāng)卵黃囊及其血管退化，臍動(dòng)脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來(lái)，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在中，動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的，與胎盤(pán)的子體部胎兒靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來(lái)的廢物運(yùn)送至胎盤(pán)，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。后由靜脈將來(lái)自胎兒的代謝廢物運(yùn)走，某種和抗體等也通過(guò)臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細(xì)胞，干細(xì)胞是生命的種子，它會(huì)分化成機(jī)體的各種細(xì)胞，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體；這些細(xì)胞可以通過(guò)分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞，并具有造血支持、調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用；目前，多用于風(fēng)濕的。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有調(diào)節(jié)、和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主?。?span lang="EN-US">GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞采用組織貼塊法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD29、CD44熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Primary human adipose microvascular endothelial cells |
雜交瘤細(xì)胞株；43-H-8 |
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兔DRG神經(jīng)元細(xì)胞 Rabbit DRG neuron cell |
抗人肝癌單抗HAb18雜交瘤細(xì)胞；HAb18 |
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3T3-L1 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 |
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小鼠胸腺上皮細(xì)胞 |
抗人TATAbox結(jié)合蛋白反應(yīng)蛋白單抗7 |
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MCF-7/DDP (人乳腺癌順鉑耐藥性細(xì)胞) |
人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Primary human adipose microvascular endothelial cells |
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人胚胎氣管組織來(lái)源細(xì)胞；CCC-HBE-2 |
人外周血細(xì)胞系；U266B1 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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Centromeric histone H3-like protein-1 |
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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DMT1 |
羧基端小結(jié)構(gòu)域磷酸酶1抗體 |
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金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體 |
LIPT1 |
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多效生長(zhǎng)因子抗體 Anti-PTN/Pleiotrophin |
硫辛酰連接酶抗體 |
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組蛋白H3樣蛋白抗體 |
人甲狀旁腺1-34(PTH 1-34)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶1抗體 Anti-SGK1 |
iFABP ELISA Kit |
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抗細(xì)胞凋亡蛋白OLFM44抗體 Anti-OLFM4 |
液泡分選蛋白4抗體 Anti-VPS4a |
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5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體 |
腫瘤壞死因子配體超家族成員15抗體 Anti-TNFSF15/TL1A |
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四分子交聯(lián)體20抗體（四旋蛋白） Anti-TSPAN20/UPIb |
環(huán)指蛋白121抗體 Anti-RNF121 |
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C5orf48 |
鈉氫通道蛋白抗體 Anti-NHE1/APNH1 |
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NCK銜接蛋白1/2抗體 |
酵母蛋白提取試劑盒50T |
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大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pGEFP-AM） |
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP |
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人高敏甲狀腺素(u-T4)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
NCK adaptor protein 1/2 |
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AVPR1A |
/酵母細(xì)胞線粒體分離（高純）試劑盒 |
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抗1A抗體 |
大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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KIAA1751蛋白抗體 |
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞KIAA1751 |
原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。