原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號
P-X1835
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
腎組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳2-3代
用途
僅供科研
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是**尿液，借以體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有功能，**腎素、促紅細(xì)胞**素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾**原尿的一團毛細(xì)血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一類特殊微血管類型的細(xì)胞。細(xì)胞為圓形、多角形，單層貼壁生長；細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球壁腔側(cè)，與血流直接接觸，是腎小球濾過膜的道屏障，可粘附和白細(xì)胞，修復(fù)基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究價值。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化，結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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人胰腺星狀細(xì)胞 Human primary pancreatic stellate cells；HPSC |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；1H7F8C12E5 |
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兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Rabbit primary intestinal microvascular endothelial cells |
大鼠肝細(xì)胞瘤；H4-II-E-C3 |
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C2C12 (小鼠成肌細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
人肺腺癌未經(jīng)放化療細(xì)胞 |
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人肌瘤組織源細(xì)胞 |
抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白單抗7 |
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MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145] (非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞) |
人胰腺星狀細(xì)胞 Human primary pancreatic stellate cells；HPSC |
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人胚腎二倍體細(xì)胞；CCC-HEK-1 |
人類粒細(xì)胞系；Human Cell line 1D3 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理條件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實驗需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因為過多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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MTF2 |
APC標(biāo)記的兔抗人IgM |
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C21orf91 |
2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體 |
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21號染色體開放閱讀框91抗體 |
HSPC302/TBCK |
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人半乳糖(Galactose)elisa分析檢測試劑盒 |
TBC結(jié)構(gòu)域的蛋白激酶樣蛋白抗體 |
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金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子2抗體 |
磷酸化Runx3抗體 |
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小鼠胰島素受體底物2(IRS2)elisa檢測試劑盒 |
Rabbit Anti-Human IgM / APC |
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大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)elisa檢測試劑盒 |
微管相關(guān)源蛋白TPX2抗體 Anti-TPX2 |
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人抵抗素樣分子β(RELM-β)elisa分析檢測試劑盒 |
磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 Anti-phospho-STAT6(Tyr641) |
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組織MAPKAP KINASE3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） |
谷氨酸受體2B抗體 Anti-NMDAR2B |
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HumanRELM-β檢測試劑盒 |
RAS抑制蛋白1抗體 Anti-RIN1 |
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倉鼠E選擇素(SELE)elisa分析檢測試劑盒 |
魚類白介素1α(IL-1α)elisa檢測試劑盒 |
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大量/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒 |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長春新堿耐藥株；HCT-8/V |
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人非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)elisa分析檢測試劑盒 |
SELE ELISA kit |
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GuineaPigAlbumin檢測試劑盒 |
β-EP檢測試劑盒 |
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豚鼠白蛋白elisa分析檢測試劑盒 |
大鼠抗/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)elisa檢測試劑盒 |
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大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞PV-Ab Elisa kit |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時，需要注意以下幾點：
二、?無菌操作?：整個過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對于需要長期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。