原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號(hào)
P-X2216
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
角膜組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品類別
兔原代細(xì)胞
傳代特性
可傳1-3代
用途
僅供科研
兔角膜上皮細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。其主要功能如下：①角膜是的無(wú)血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細(xì)胞層，外層即是上皮細(xì)胞；②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性，能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng)；③角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫酶。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(zhǎng)因子和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔角膜上皮細(xì)胞采用混合膠原酶消化結(jié)合上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔角膜上皮細(xì)胞經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔垂體細(xì)胞 Rabbit pituitary cell |
雜交瘤細(xì)胞；2D8F9H12 |
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小鼠脂肪干細(xì)胞 Mouse primary adipose stem cells |
雜交瘤細(xì)胞；1C |
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HT-1376(人膀胱癌細(xì)胞)（STR鑒定正確） |
人喉表皮樣癌細(xì)胞 |
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小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 |
人卵巢癌多藥耐藥細(xì)胞 |
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MG-63 (人骨肉瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔垂體細(xì)胞 Rabbit pituitary cell |
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人乳腺癌細(xì)胞；HCC1937 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-576 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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源盒蛋白D3抗體 HOXD3 |
動(dòng)物細(xì)胞氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
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Rho鳥甘酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 ARHGEF11 |
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 |
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RAGEF2蛋白抗體 RAGEF2 |
NKAIN1 |
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巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6抗體 FUT6 |
NKAIN1蛋白抗體 |
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碳酸酐酶1抗體 CA I |
大鼠白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體 ASC/TMS1 |
人γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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蛋白酶體PSMβ6抗體 Proteasome 20S beta 6 |
2號(hào)染色體開放閱讀框80抗體 C2orf80 |
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FCRL6蛋白抗體 FCRL6 |
甲狀腺素T4抗體 T4/L-Thyroxine |
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血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 VEGFA |
基質(zhì)金屬蛋白酶-1單克隆抗體 MMP1 |
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FITC標(biāo)記小鼠CD45單克隆抗體 mouse CD45/FITC |
6號(hào)染色體開放閱讀框15抗體 C6orf15 |
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棉鈴蟲紫外波長(zhǎng)敏感的視蛋白抗體 Ultraviolet wavelength-sensitive opsin |
環(huán)指蛋白14抗體 Anti-RNF14 |
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鋅指蛋白772抗體 Anti-ZNF772 |
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；MDA-MB-134Ⅵ |
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神經(jīng)肽S抗體 Anti-NPS/Neuropeptide S |
囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 VAPA |
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隱孢子蟲（Cryptosporidium）涂片施樂-尼爾森（Zielh-Nielson）染色試劑盒 |
谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT)測(cè)試盒 |
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人黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
SPG48蛋白抗體 Anti-SPG48 |
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大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)elisa檢測(cè)試劑盒 |
兔角膜上皮細(xì)胞小鼠elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。