使用范圍：
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。

產(chǎn)品貨號(hào)	P-X1750	產(chǎn)品規(guī)格	5×105
組織來(lái)源	視網(wǎng)膜組織	生長(zhǎng)特性	貼壁
細(xì)胞形態(tài)	神經(jīng)元細(xì)胞樣	產(chǎn)品類別	大鼠原代細(xì)胞
傳代特性	屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群	用途	僅供科研

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成，兩層間在病理情況下可分開(kāi)，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列，部分細(xì)胞聚集成團(tuán)，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對(duì)透明，有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起；該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞，在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制有利于青光眼發(fā)病機(jī)制的研究。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法，結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞經(jīng)CD90熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

相關(guān)產(chǎn)品：

兔肺成纖維細(xì)胞 Rabbit lung fibroblasts	雜交瘤細(xì)胞；140-1
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 Primary mouse pancreatic duct epithelial cells	雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8
PL45（人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞）	人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞
人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞	人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株
MIN6（小鼠胰島瘤細(xì)胞）	兔肺成纖維細(xì)胞 Rabbit lung fibroblasts
人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-435S	人甲狀腺鱗癌細(xì)胞；SW579 [SW 579；SW-579]

原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。
5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi)，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

人肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa分析檢測(cè)試劑盒	Mannan Binding Lectin
大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)elisa檢測(cè)試劑盒	細(xì)胞色素P450 2D10抗體
HumanL-FABPELISAKit	LYPD1
Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體  Anti-ROCK2	LYPD1蛋白抗體
CCL6 ELISA kit	DENND2A
大鼠C-C趨化因子6(CCL6)elisa分析檢測(cè)試劑盒	DENND2A蛋白抗體
Saitohin蛋白抗體  Anti-STH/Saitohin	小鼠微管蛋白β3(TUBB3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
phospho-APC6 (Thr560)	甘露聚糖結(jié)合凝集素抗體
肉豆蔻?；D(zhuǎn)移酶2-N端肽抗體  Anti-NMT2	酵母F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
鋅指蛋白ZBTB38抗體  Anti-ZBTB38	人β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)elisa檢測(cè)試劑盒
Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / FITC	蛋白激酶Aγ抗體  Anti-PKA gamma
FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM	人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞；OV-1063
神經(jīng)突觸素3抗體  Anti-Synapsin III	磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體
磷酸化鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體  Anti-Phospho-Troponin I(Ser23/24)	原鈣粘蛋白15抗體
Histone H2B (mono methyl K5)	血小板活化因子抗體  Anti-PAF
PCDHB15	大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞單甲基組蛋白H2B K5抗體